口蹄疫病毒VP1基因的原核可溶性表达

王海烽; 易忠; 魏玉荣; 魏婕; 胡尔马西; 符子华; 《中国畜牧兽医 》 2009 北大核心

摘要：针对重组原核表达载体表达目的蛋白以包涵体形式存在的问题,作者对影响外源蛋白表达的IPTG的浓度、温度、时间等因素均进行了探索,以观察VP1蛋白的可溶性情况。通过PCR技术将VP1基因克隆至pGEM-T载体中,然后将pET-28a(+)和pGEM-T载体分别进行双酶切,构建重组的pET-28a-VP1载体,将重组载体转化至BL21中,诱导后经SDS-PAGE检测可见约29 ku的目的蛋白条带。插入的外源目的蛋白主要以包涵体的形式存在,上清中的可溶性蛋白甚微。试验结果表明,这可能与蛋白本身的氨基酸组成有重要关联。

关键词： 口蹄疫病毒 VP1基因 原核 可溶性表达