小反刍兽疫核酸疫苗的制备及免疫效果评估

赵洁雅; 黄炯; 汪阳; 苗书魁; 王杰; 沈辰峰; 木克日木; 古丽扎提; 汪萍; 夏俊; 《黑龙江畜牧兽医 》 2021 北大核心

摘要：为了制备针对小反刍兽疫病毒（Peste des peties ruminants virus, PPRV）F基因的核酸疫苗,并评价其对小鼠的免疫效果,试验采用DNA重组技术将F基因、优化密码子后的F基因以及连接乙型脑炎病毒信号肽（JEVSP）的优化密码子后的F基因3个目的片段分别克隆到真核表达载体pcDNA3.1（+）,构建重组质粒pcDNA3.1（+）-F、pcDNA3.1（+）-F-opt和pcDNA3.1（+）-JEVSP-F-opt,大量培养重组质粒菌后,以碱裂解法将菌体悬浮裂解,经中空纤维切向流超滤和微滤浓缩处理,将制备的核酸疫苗以100μg/只的剂量给Balb/c小鼠肌肉注射免疫,共分为4组,pcDNA3.1（+）-F组、pcDNA3.1（+）-F-opt组、pcDNA3.1（+）-JEVSP-F-opt组和pcDNA3.1（+）空载体组,每隔14 d免疫1次,共免疫3次,每次免疫14 d后利用中和试验检测抗体水平。结果表明:成功制备核酸疫苗pcDNA3.1（+）-F、pcDNA3.1（+）-F-opt和pcDNA3.1（+）-JEVSP-F-opt,免疫Balb/c小鼠14 d后pcDNA3.1（+）空载体免疫组中和抗体阳性率为0,pcDNA3.1（+）-F组、pcDNA3.1（+）-F-opt组、pcDNA3.1（+）-JEVSP-F-opt组抗体转阳性,且pcDNA3.1（+）-F-opt组、pcDNA3.1（+）-JEVSP-F-opt组抗体水平呈逐渐增加的趋势。说明成功制备小反刍兽疫核酸疫苗,并且能在小鼠上产生抗体。

关键词： 小反刍兽疫 F基因 核酸疫苗 制备工艺 浓缩 免疫水平