牛卵母细胞玻璃化冷冻对基因mRNA表达量的影响

林嘉鹏; 王静; 赵云程; 陈童; 汪立芹; 陈博; 黄俊成; 《中国实验动物学报 》 2011 CSCD

摘要：目的将处于生发泡期(GV期)和体外成熟期(IVM)的牛卵母细胞进行玻璃化冷冻-解冻,对其卵裂率和囊胚率以及一些与发育相关基因的mRNA表达量进行评价。方法玻璃化冷冻GV期(n=224)和IVM期(n=235)牛卵母细胞,解冻后对其进行体外培养并采用quantitative real time-PCR技术对冷冻-解冻后的GV和IVM期卵母细胞中Bax、Dnmt1、Hdac1、Cyclinb1、Cdc2和Cu Zn SOD等基因的mRNA表达量进行检测。结果 GV期和IVM期卵母细胞经过冷冻-解冻后,卵裂率(14.7%～89.4%,34.5%～89.4%,P<0.001)及囊胚率(3.0%～28.4%,12.3%～28.4%,P<0.001)均极显著低于对照组(n=238),且冷冻-解冻后的GV期卵母细胞卵裂率(14.7%～34.5%,P<0.001)和囊胚率(3.0%～12.3%,P<0.001)极显著低于冷冻-解冻后的IVM期卵母细胞;GV期卵母细胞经玻璃化冷冻后,Dnmt1和Cu Zn SOD基因的mRNA表达量显著低于对照组(P<0.05),其余基因mRNA表达量变化不显著;对M期卵母细胞而言,Bax基因mRNA表达量极显著低于对照组(P<0.01),Cyclinb1、Cdc2和Cu Zn SOD基因的mRNA表达量显著低于对照组(P<0.05),其余基因表达量没有发生显著变化。结论对牛GV期或IVM卵母细胞进行玻璃化冷冻可能会导致基因mRNA表达量降低,可能会对胚胎发育产生负面影响。

关键词： 玻璃化冷冻 基因表达 牛卵母细胞 发育能力