山羊环鸟苷酸-腺苷酸合成酶的原核表达及其酶活性分析

韦雨松; 张艳; 田慧慧; 翟军军; 陈国华; 房永祥; 景志忠; 屈雷; 米晓云; 何小兵; 《中国兽医科学 》 2024 北大核心 CSCD

摘要：为了研究山羊环鸟苷酸-腺苷酸合成酶（gcGAS）的生物学功能，通过构建含gcGAS基因的pET28a-gcGAS原核表达载体，在Rosetta (DE3)表达菌中进行表达，经纯化获得了纯度较高的重组gcGAS蛋白，并测定其酶促活性。结果显示，在优化表达条件下，实现了重组gcGAS蛋白的可溶性表达，其能以ATP和GTP为底物合成了第二信使分子2′3′-c GAMP。结论：原核表达的可溶性重组gcGAS蛋白具有生物酶催化活性，这为后续gcGAS介导的抗病毒天然免疫机制研究及其应用开发奠定了一定的基础。

关键词： 环鸟苷酸-腺苷酸合成酶 环鸟苷酸-腺苷酸 原核表达 蛋白纯化 酶活性