羊BLG基因5′和3′调控区克隆及其调控GFP基因在乳腺细胞的表达

刘明军; 李文蓉; 武坚; 黄俊成; 郭志勤; 曲新勇; Paul Kroon; 《生物工程学报 》 2002 北大核心 CSCD

关键词： 羊乳球蛋白 基因克隆 绿色荧光蛋白 乳腺细胞系 表达

人胰岛素原乳腺表达基因构建及其在转基因小鼠乳汁中的表达

刘明军; 武坚; 李文蓉; 黄俊成; 杨冬梅; 玛依拉; 郭志勤; 《草食家畜 》 2001

摘要：从绵羊和人的基因组中用PCR扩增分别克隆了羊乳球蛋白 (BLG) 5’和 3’调控区及人胰岛素原 (hINS)基因组DNA ,并以此为基础构建了人胰岛素原乳腺表达载体 ( pSh -BLG -hINS)。该表达载体包括 4.2kbBLG 5’调控区和 2 .1kbBLG 3’调控区 ,以及 1 .2kb人胰岛素原基因组DNA。将绿色荧光蛋白基因与BLG 5’和 3’调控区融合后转化乳腺细胞系 (TD47) ,通过荧光显微镜观察和紫外吸收检测 ,证明GFP在TD47乳腺细胞系中获得了表达。用BLG -hINS基因分别注射小鼠 ,通过PCR和限制性内切酶检测分析 ,共获得 5只转基因小鼠。经放免 (RIA)检测 ,两只转基因母鼠乳汁中人胰岛素原的表达量分别为 37.44和 39.99mg/L。该结果表明 ,本文所构建的 pBLG乳腺表达结构 ,能够调控外源基因在乳腺表达

关键词： 人胰岛素原 羊乳球蛋白 转基因 乳腺表达