牛结核杆菌DNA疫苗的纯化工艺研究及质量鉴定

宋振忠; 黄炯; 徐雪萍; 徐志光; 张云峰; 蔡宏; 许礼义; 呼西旦; 《中国畜牧兽医 》 2011 北大核心

摘要：为获得纯度较高,能进行动物免疫试验的DNA疫苗,在高密度发酵工程菌的基础上,通过传统的碱裂解,获得粗提的质粒;用氯化钙去除裂解液中的大部分RNA,并用Sartobran P囊式过滤器获得了澄清的溶液。用聚乙二醇法沉淀超螺旋质粒DNA,去除大部分菌体蛋白和宿主DNA。最后用source 30Q阴离子交换色谱填料去除几乎全部的内毒素并浓缩了质粒。本试验纯化的DNA疫苗经质量检验达到了转染动物的要求。该工艺实现了一步色谱纯化DNA疫苗的目的,具有工艺简单、快速的优点。

关键词： DNA疫苗 纯化 聚乙二醇 阴离子交换 质量鉴定