科研产出
肺炎克雷伯菌与链球菌双重PCR检测方法的构建
《草食家畜 》 2024
摘要：【目的】旨在建立一种可同时检测肺炎克雷伯菌和链球菌的双重PCR检测方法。【方法】选取肺炎克雷伯菌KP-Khe基因和链球菌EF-Tu基因保守片段，分别合成2对特异性引物，优化双重PCR反应体系，摸索其特异性、最佳退火温度、引物浓度和细菌核酸浓度，并通过该方法对临床样品进行检测验证。【结果】该双重PCR检测方法可有效扩增出肺炎克雷伯菌和链球菌的489 bp和197 bp的特异性片段，最适退火温度为58℃、最适引物浓度为12 ng/μL、最适模板浓度为3 ng/μL。将该方法应用于临床对15份样品进行检测，其中2份样品检测出肺炎克雷伯菌呈阳性，1份样品检测出链球菌呈阳性，与分离鉴定结果一致。【结论】该研究建立的双重PCR技术，可为临床诊断肺炎克雷伯菌、链球菌及混合感染提供了一种便捷高效的检测方法，具有一定的应用价值。
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新疆部分地区肺炎犊牛肺炎克雷伯菌流行情况调查及其部分生物学特性分析
《中国兽医学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：无菌采集部分地区肺炎犊牛的鼻拭子，常规法进行肺炎克雷伯菌（Klebsiella pneumoniae,KPn）分离鉴定，并进行16S rDNA序列进化树分析；K-B法检测其耐药性，选取1株携带多重毒力的分离株进行小鼠半数致死量LD50试验，PCR法检测分离株的血清型、毒力基因和耐药基因。结果显示，新疆阿克苏、昌吉、伊犁3个地区共218份肺炎犊牛鼻拭子KPn检出率为14.68%（32/218）,其中阿克苏地区为28.33%（17/60）、昌吉地区为24.00%（6/25）、伊犁地区为6.77%（9/133）,分为2种血清型，分别为K1（7/32）和K5（5/32）;菌株共检测到KPn的13种毒力基因，主要以mrkD、ureA、wabG、uge、entB为主；LD50为2.38×10～7 CFU/mL;药敏试验及耐药基因检测发现，分离菌株表现为多重耐药，其携带耐药基因主要以blaSHV、floR为主，16S rDNA序列进化树结果显示，分离株与意大利、中国北京、中国上海等地分离株同源性较高。结果表明，新疆地区肺炎犊牛鼻拭子的KPn检出率较高；优势血清型为K1和K5;分离株携带多种毒力基因，致病力较强，且均为产ESBLs的KPn菌株，提示新疆地区KPn对犊牛具有一定的潜在危害。
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