应用牙釉蛋白(AML)基因鉴别牛早期胚胎性别

幸宇云; 陈从英; 黄路生; 任军; 陈静波; 《农业生物技术学报 》 2005 CSCD

摘要：牛牙釉蛋白(AML)基因定位于牛X染色体和Y染色体上的同源区域。实验根据牛X、Y染色体AML基因第五内含子上序列同源性只有45.1%以及X、Y染色体该区段之间存在多处碱基缺失的特点,合成了1对性别特异性引物。该引物经扩增后母牛只得到1条467bp的来自X染色体的扩增条带,而公牛能得到1条源自X染色体的467bp片段的扩增条带和1条源自Y染色体的341bp的扩增条带。经基因组DNA验证,该引物的公母鉴定准确率为100%,同时该对引物具有高度的牛特异性。定量分析AML基因引物的反应灵敏度,发现1次PCR(30个循环)能扩增出0.5ng的基因组DNA,2次PCR(共50个循环)能扩增出20pg的基因组DNA。将AML基因引物与SRY基因引物的反应灵敏度相比较,结果表明前者的灵敏度比后者的高8～10倍。用AML基因反应体系鉴定了26枚优质胚胎,其中24枚有扩增结果,13枚鉴定为公牛,11枚鉴定为母牛。

关键词： AML基因 牛 胚胎 性别鉴定