科研产出
一起放牧羊群布鲁氏菌病的分析检测
《新疆农业科学 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：【目的】研究一起放牧羊群布鲁氏菌病（布病）分析检测方法适用性，为防治措施提供依据。【方法】采用RBT、GICA、SAT、MAT、FPA、iELISA、cELISA和PCR等方法检测90份来自流产羊群的血清样品，并从诊断方法的适用性特点、现场调查的结果进行统计分析。【结果】在90份羊血清样品中，RBT、GICA、SAT、MAT、FPA、iELISA、cELISA的阳性检出率分别为：8.89%（8/90）、12.22%（11/90）、17.78%（16/90）、14.44%（13/90）、21.11%（19/90）、25.56%（23/90）、24.44%（22/90）,PCR检测出14份阳性。【结论】初筛可选用RBT、GICA、FPA或iELISA等方法，确诊选用SAT、MAT或cELISA等方法。放牧羊群布病阳性率随年龄增加呈上升趋势（成年羊42%＞断奶羔羊2.5%）;雌性羊布病阳性率高于雄性（雌性29.68%＞雄性11.54%）,有流产史的羊群患布病的风险更高，成年雌性羊更易感染布鲁氏菌。检出阳性羊进行无害化处理，羊舍和周围环境进行彻底消毒，使用布病M5-90弱毒疫苗对阴性羊进行免疫，免疫2个月后允许交易和屠宰。
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慢病毒生产卵泡抑素转基因绵阳PCR检测方法的建立(英文)
《Agricultural Science & Technology 》 2014
摘要：[目的]建立稳定快速的慢病毒转基因羊DNA水平检测方法。[方法]采集初生转基因羔羊的子叶、脐带、尾组织以及死亡羔羊的全身各组织,提取基因组DNA作为模板进行PCR检测,以Follistatin基因N+D1片段特异性引物进行PCR检测;同时,对慢病毒载体的CMV启动子、5’-LTR等结构元件进行PCR检测;提取死亡羔羊的全身组织以及转基因羔羊的活体肌肉组织总RNA,进行RTPCR检测。[结果]采用试剂盒提取的基因组DNA比常规方法提取的DNA快速、高效,且更易被检测,扩增时的引物采用载体上游与目标基因下游的组合大大增加了检测的特异性,避免了内源性目标基因的干扰而造成假阳性;初生转基因羔羊的尾组织可作为PCR检测的组织样品,其结果可靠、准确;对CMV启动子及5’-LTR等结构元件作PCR检测为转基因动物的安全性考察提供了数据,同时验证了转基因羔羊目的基因的检测结果;对转基因羔羊肌肉组织提取总RNA后进行RT-PCR检测,其中有3只羔羊没有检测到转录产物,其他均有转录。[结论]该研究建立的转基因绵羊PCR检测方法高效、快速且准确,为进一步蛋白水平检测提供试验依据,也为建立转基因绵羊系统性多层次的检测方法奠定基础,还为转基因绵羊的安全监测提供了稳定的技术平台。
关键词： FS N+D1 慢病毒卵周隙显微注射 转基因绵羊 PCR方法
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