科研产出
细粒棘球绦虫TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用
《中国人兽共患病学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：目的为建立高效、特异的细粒棘球绦虫（Echinococcus granulosus,Eg）检测方法。方法本研究设计了一组基于Eg线粒体基因的特异性引物和TaqMan探针,通过反应体系及条件的优化,建立了Eg荧光定量PCR检测方法。结果该方法线性关系好,灵敏度高,在109～102拷贝/μL相关系数达0.998,灵敏度达102拷贝/L;在特异性试验中,与其他病原虫株无交叉反应,特异性较好;重复性试验变异系数均低于3%。应用该方法对50份临床样品进行检测,发现6份为Eg感染阳性。结论由此可见,建立的荧光定量PCR方法可快速、灵敏、特异地检测细粒棘球绦虫,具有一定的实际应用价值。
关键词： 细粒棘球绦虫 TaqMan探针 实时荧光定量PCR
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多房棘球绦虫TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用
《中国兽医学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：为建立高效、特异的多房棘球绦虫（Echinococcus multilocularis,E.m）检测方法,本研究设计了1组基于E.m线粒体NADH脱氢酶亚基3（NADH3）基因的特异性引物和TaqMan探针,通过对反应体系及条件进行优化,建立了E.m荧光定量PCR检测方法。结果显示,该方法线性关系好,灵敏度高,在109～101 拷贝/μL相关系数达0.998,灵敏度达10拷贝/μL;在特异性试验中,与其他病原虫株无交叉反应,特异性较好;重复性试验（组间和组内）的变异系数均小于3%。应用建立的方法对采集的50份临床样品进行检测,发现9份为E.m感染阳性。由此可见,建立的荧光定量PCR方法可用于泡型包虫病（alveolar echinococcosis, AE）的快速检测、定量分析及流行病学调查。
关键词： 多房棘球绦虫 TaqMan探针 实时荧光定量PCR
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