科研产出
犬细粒棘球绦虫抗原ELISA检测方法的建立
《畜牧与兽医 》 2024 北大核心
摘要：旨在建立敏感特异的犬细粒棘球绦虫(Eg)抗原ELISA检测方法。用细粒棘球绦虫表膜抗原(EgSfAg)免疫兔获得抗血清，同时利用抗EgSfAg杂交瘤细胞株4E8制备单抗，通过亲和层析获得纯化的多抗和单抗4E8,制备Eg、多房棘球绦虫、泡状带绦虫、多头绦虫和犬弓首蛔虫等5种蠕虫抗原作为特异性质控样品，利用单抗4E8进行Western blot检测，通过人工感染犬结合氢溴酸槟榔碱下泄法制备阳性对照样品，同时设置敏感性质控样品和阴性对照样品，构建样品盘，以多抗为捕捉抗体，HRP标记的单抗4E8为检测抗体，建立犬Eg抗原ELISA检测方法，并验证该方法的敏感性和特异性。结果：Western blot检测证明单抗4E8仅与EgSfAg有特异性反应；建立的ELISA检测方法最低检出量为1∶512;对130份阳性样品的平均检出率为95.38%;交叉试验结果显示仅EgSfAg结果为阳性；检测150份阴性样品的平均符合率为95.56%。综上，建立的ELISA方法具有较好敏感性和特异性，为终末宿主棘球蚴病的诊断和流行病学调查提供了一种安全、简便、高效的免疫学检测方法。
关键词： 细粒棘球绦虫 抗原 单克隆抗体 ELISA 样品盘
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新疆某地区犬流感病毒血清学及病原学调查
《塔里木大学学报 》 2021
摘要：为了解新疆某地区流浪犬和宠物犬群体中犬流感现状,应用ELISA方法和RT-PCR方法,分别对2019年1月至9月期间收集的流浪犬和宠物犬共计250份血清样本和179份鼻拭子样本进行血清学和病原学检测。检测结果显示:血清学检测流浪犬和宠物犬流感抗体阳性率分别是58%（58/100）和5.33%（8/150）;病原学检测流浪犬和宠物犬流感病毒抗原阳性率分别是4%（4/100）和1.27%（1/79）,RT-PCR产物测序序列经BLASTn比对与犬流感H3N2亚型同源性最高。血清学结果显示调查地区一定比例的流浪犬和宠物犬曾感染犬流感;病原学结果显示调查地区流行H3N2亚型犬流感。犬流感病毒血清学及病原学调查可为公共卫生安全评估提供参考。
关键词： 犬流感病毒 血清学 病原学 ELISA RT-PCR
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几种布鲁氏菌ELISA抗体试剂盒对牛血清的临床检测评价
《中国兽医杂志 》 2021 北大核心
摘要：为了评价目前市面流通的部分ELISA布鲁氏菌病（简称"布病"）抗体检测试剂盒对牛血清的检测效果,本试验采集了不同地区的牛血清样品300份,应用虎红平板凝集试验（RBT）及试管凝集试验（SAT）进行了布病抗体阴阳性确诊后,用不同厂家的ELISA试剂盒开展了比对试验。结果表明,4种iELISA布病抗体检测试剂盒的敏感性在97.9%～100.0%,特异性介于18.2%～27.3%,总体符合率在74.3%～77.1%,两两试剂盒检测结果之间的Kappa值分布在0.707～0.916。5种cELISA布病抗体检测试剂盒的敏感性在95.8%～100.0%,特异性介于22.7%～81.8%,总体符合率在74.3%～92.9%,两两试剂盒检测结果之间的Kappa值分布在0.394～0.972。本研究结果表明,不同厂家的ELISA试剂盒的检测结果存在差异性,这将为布鲁氏菌病的临床确诊提供了数据基础。
关键词： 布鲁氏菌 布鲁氏菌病 牛 iELISA cELISA 评价
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新疆部分地区三种重要牛羊虫媒病毒病流行情况调查
《草食家畜 》 2018
摘要：本研究采用酶联免疫吸附实验(ELISA)的方法,对新疆四个地区(哈密地区、昌吉地区、伊犁地区和和田地区)的106份牛、羊血样分别进行了蓝舌病(BT)、牛流行热(BEF)和鹿流行性出血热(EHD)的抗体检测。结果显示蓝舌病(BT)抗体仅在哈密地区血样中检出,其中牛检出率为12.90%,羊检出率为60%;牛流行热(BEF)抗体在哈密、伊犁和和田地区的牛血清样本中检出率均为100%,昌吉地区检出率为55%;鹿流行性出血热(EHD)抗体仅在哈密地区羊血清样本中检出,检出率为20%。哈密地区的牛血清样本中同时检出BEFV和BTV两种病毒的为12.9%,羊血清样本中同时检出BTV和EHDV两种病毒的为20%;以上结果说明在新疆地区有蓝舌病、牛流行热和鹿流行性出血热的流行,并且存在多种虫媒病混合感染的情况,应在实际检测、防疫工作中加以注意。
关键词： 蓝舌病 牛流行热 鹿流行性出血热 间接ELISA C-ELISA
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阻断ELISA与病毒中和试验检测PPR抗体的比较分析
《中国预防兽医学报 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：为选择一种简便、快速、敏感性高、特异性好的小反刍兽疫(PPR)血清学检测方法,本实验收集了506份山羊和绵羊血清样品,采用ELISA和病毒中和试验(VNT)两种方法对PPR病毒(PPRV)抗体进行检测。结果显示ELISA和VNT检出的阳性率分别为44.9%和48.6%。两种方法的符合率Kappa值为0.925,表明这两种方法具有较高的一致性,但ELISA更简便、快速、敏感,更便于基层单位使用。本研究为PPR血清流行病学调查及疫苗免疫效果评价方法的选择提供相关的技术参数。
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细粒棘球绦虫感染终末宿主检测方法的评价
《畜牧与兽医 》 2015 北大核心
摘要：对细粒棘球绦虫感染家/牧犬常用的检测方法开展比对试验,并予以评估。对人工感染细粒棘球绦虫试验犬含卵粪样在不同时段用饱和蔗糖液(1.28 g/m L)漂浮虫卵,镜检;经化学药物驱虫,收集人工感染试验犬驱虫前、后粪样,流行病学调查中收集的家/牧犬粪样,用粪抗原抗体夹心ELISA检测试剂盒检测,同时,对检出的家/牧犬阳性粪样,再用虫卵漂浮法复检;通过氢溴酸槟榔碱下泻法检查家/牧犬感染细粒棘球绦虫虫体,同时,对下泻犬粪样用粪抗原检测和虫卵漂浮法进行复检。饱和蔗糖液漂浮虫卵最佳时段为2 h,可检出虫卵量与其他时段差异显著(P<0.05);人工感染犬驱虫前、后粪样经粪抗原检测,OD值差异极显著(P<0.01);对12 288份家/牧犬粪样进行粪抗原检测,阳性样品991份,感染率为8.1%(991/12 288),对991份阳性粪样进行虫卵漂浮法复检,检查出54份粪样中含虫卵。经下泻法检查312只家牧犬,其中,262只犬下泻,检查出27只犬感染细粒棘球绦虫成虫;对262份下泻犬粪样进行粪抗原检测,阳性29份;对262份下泻犬粪样用虫卵漂浮法检查,仅14份粪样检出虫卵。犬粪抗原抗体夹心ELISA检测犬感染细粒棘球绦虫可及时区分驱虫前、后感染状况,其更为安全、快捷、准确。
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泰勒焦虫重组蛋白TaSP-Tams1-SPAG1间接ELISA检测方法的建立
《新疆农业大学学报 》 2013 北大核心
摘要：以真核表达的焦虫表面抗原重组蛋白TaSP-Tams1-SPAG1作为ELISA板包被抗原,通过方阵实验确定抗原包被浓度,探索抗原包被时间、温度、一抗及二抗血清稀释度及作用时间,建立牛环形泰勒焦虫表面抗原重组蛋白ELISA方法。结果得出TaSP-Tams1-SPAG1的最佳包被浓度为10μg/mL,血清最佳稀释度为1∶100,ELISA阳性反应的临界值为OD492nm≥0.348,重复试验变异系数小于12%,所建立的ELISA方法不与牛巴贝斯虫及牛瑟氏泰勒虫血清发生反应。TaSP-Tams1-SPAG1为抗原建立的ELISA方法特异性强,敏感度高,重复性好,为牛环形泰勒焦虫病的准确检测及防治提供技术支持。
关键词： 泰勒焦虫 TaSP-Tams1-SPAG1 重组蛋白 ELISA
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EgM123免疫犬血清抗体监测
《草食家畜 》 2011
摘要：【目的】探索EgM家族重组蛋白(EgM 123)与弗氏佐剂结合免疫犬后血清抗体变化规律。【方法】利用间接ELISA法检测免疫组与对照组血清特异性抗体(IgG)的变化规律,并以Western-blotting方法进行验证。【结果】ELISA实验结果经统计学方法分析显示,不中和免疫组与对照组血清抗体时,特异性抗体IgG差异不显著(P>0.05),但中和血清抗体时,差异显著(P<0.05)。【结论】中和血清抗体,能够更明显的看到EgM家族重组蛋白(EgM 123)引起的犬特异性免疫应答。
关键词： 重组蛋白EgM123 特异性抗体 犬 ELISA Western-blotting
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牛分枝杆菌ESAT-6蛋白抗体间接ELISA方法的建立
《草食家畜 》 2010
摘要：利用分子克隆技术,提取结核分支杆菌早期分泌性抗原靶ESAT-6基因,然后对其进行克隆表达,获得高效表达的ESAT-6蛋白,Western blot证实ESAT-6蛋白可与结核牛阳性血清发生特异性反应。以纯化复性的ESAT-6重组蛋白作为诊断抗原建立的间接ELISA特异性为94%、敏感性为63.35%。交叉反应试验表明,该抗原只与牛副结核病阳性血清有交叉反应,而不与其他5种常见的牛病阳性血清发生交叉反应。用间接ELISA方法对285份PPD阳性牛血清、对74份PPD阴性牛血清、79份牛γ-干扰素(IFN-γ)检测阳性血清进行检测,其负荷率分别为62.1%、98.64%、83.54%。实验结果表明建立的间接ELISA方法可以用于牛结核病感染和免疫抗体检测,且具有很好的开发和应用前景。
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