文献类型： 中文期刊

作者： 刘原源 ¹ ; 高珺珊 ¹ ; 宫鹏涛 ¹ ; 张壮志 ² ; 李建华 ¹ ; 杨举 ¹ ; 李赫 ¹ ; 张西臣 ¹ ;

作者机构： 1.吉林大学动物医学学院

2.新疆畜牧科学院兽医研究所

关键词： 细粒棘球绦虫;EdiagA864蛋白;单克隆抗体;杂交瘤细胞

期刊名称： 中国生物制品学杂志

ISSN： 1004-5503

年卷期： 2016 年 29 卷 06 期

页码： 606-609

收录情况： CSCD

摘要： 目的制备抗细粒棘球绦虫Ediag A864单克隆抗体,并进行鉴定。方法以细粒棘球绦虫Ediag A864蛋白为抗原,经皮下多点免疫BALB/c小鼠,共免疫4次。末次免疫3 d后制备小鼠脾细胞,在聚乙二醇(PEG)的作用下与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0进行细胞融合,间接ELISA法筛选出阳性杂交瘤细胞株进行克隆,检测其染色体数及分泌的单克隆抗体亚型。采用体内培养法大量制备抗细粒棘球绦虫Ediag A864单克隆抗体,并经正辛酸-饱和硫酸铵法和Hi Trap Protein G HP亲和层析结合法纯化。结果经筛选克隆共获得4株可产生细粒棘球绦虫Ediag A864单克隆抗体的杂交瘤细胞株:2D12、3H4、4A6和6E5,细胞染色体数分别为97、101、98和96,重链亚型均为Ig G1,轻链亚型均为Kappa。2D12、3H4腹水效价为2×105,4A6和6E5腹水效价为1×105。纯化后的2D12抗体可见相对分子质量为46 000和26 000的重链和轻链条带。结论本实验获得的2D12是一株稳定的杂交瘤细胞株,且可产生高效价细粒棘球绦虫Ediag A864单克隆抗体,为细粒棘球绦虫病的免疫诊断奠定了基础。