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绵羊激活素受体IIB(ActRIIB)基因的克隆、序列分析及原核表达

文献类型： 中文期刊

作者： 张雪梅 1 ; 安静 2 ; 张宁 3 ; 刘明军 4 ;

作者机构： 1.新疆维吾尔自治区畜牧科学院生物技术研究中心

2.新疆维吾尔自治区动物生物技术重点开放实验室

3.农业部草食家畜遗传育种与繁殖重点实验室

4.新疆大学生命科学与技术学院

关键词： 绵羊;激活素受体IIB基因;序列分析;原核表达

期刊名称： Agricultural Science & Technology

ISSN： 1009-4229

年卷期： 2014 年 10 期

页码： 1644-1648

摘要： [目的]旨在克隆绵羊激活素受体IIB(ActRIIB)基因,并构建原核表达载体进行体外表达,为进一步验证功能奠定基础。[方法]以绵羊肝脏组织为材料,以提取总RNA反转录得到的cDNA为模板,利用同源序列克隆技术,对绵羊ActRIIB基因的cDNA全长进行克隆,并对其进行生物信息学分析。再根据克隆序列设计引物,将其与原核表达载体pET41a连接,构建重组表达质粒pET41a-ActRIIB,经IPTG诱导后进行表达鉴定。[结果]扩增获得绵羊ActRIIB基因cDNA全长1 564 bp(Genbank登陆号为:JX422071.1),最大开放阅读框为1 539 bp,共编码512个氨基酸;其氨基酸序列与牛的同源性最高(99.6%),ActRIIB的C末端区域高度同源且属于TGFβ家族。原核诱导表达获得符合预期大小(约92 kD)并带有组氨酸标签序列的ActRIIB重组蛋白。[结论]绵羊ActRIIB基因的克隆和表达为进一步研究其生物学功能奠定了基础。

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