文献类型： 中文期刊

作者： 潘晓燕 ¹ ; 王正朝 ² ; 李质馨 ¹ ; 金玉姬 ¹ ; 窦肇华 ¹ ; 郭志勤 ³ ; 王锋 ⁴ ;

作者机构： 1.吉林医药学院

2.弗吉尼亚联邦大学医学院

3.新疆畜牧科学院

4.南京农业大学

关键词： 秋水仙素;卵母细胞;化学辅助去核;重构胚

期刊名称： 生物工程学报

ISSN： 1000-3061

年卷期： 2009 年 25 卷 04 期

页码： 30-35

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为提高绵羊体细胞核移植的效率,本研究采用一种新的去核方法—化学辅助去核法,对绵羊体外成熟的卵母细胞进行去核,研究了化学诱导剂秋水仙素的处理浓度、作用时间、卵母细胞的成熟时间对去核效果及重构胚发育的影响。结果表明:1)卵母细胞在0.4μg/mL的秋水仙素溶液中分别孵育0.5h和1h,胞质突起率和去核率没有显著的差异,突起率可高达85.4%,去核率达到100%;2)0.2μg/mL或0.4μg/mL秋水仙素溶液将卵母细胞处理0.5h,对去核效果没有显著影响;3)对于体外成熟18～23h的卵母细胞,随着成熟时间的延长,盲吸法的去核率降低,但没有影响秋水仙素诱导胞质突起的比率和去核率;4)两种去核方法对重构胚的发育没有产生显著影响,但成熟21～23h卵母细胞重构胚囊胚的发育率显著高于成熟18～20h卵母细胞重构胚囊胚的发育率。综上所述,本试验优化了绵羊卵母细胞化学辅助的去核程序,利用化学辅助去核法对高卵龄的绵羊卵母细胞进行去核,提高了去核率和重构胚的体外发育率。