文献类型： 中文期刊
作者： 薛倩 1 ; 马文戈 2 ; 沙依兰·卡依扎 2 ; 汪萍 2 ; 韩涛 2 ; 苗书魁 2 ; 夏俊 2 ; 陆桂丽 2 ;
作者机构： 1.新疆农业大学动物医学学院
2.新疆畜牧科学院兽医研究所/新疆畜牧科学院动物临床医学研究中心
关键词： 禽流感病毒;多拷贝整合;病毒样颗粒
期刊名称： 新疆农业科学
ISSN： 1001-4330
年卷期： 2021 年 58 卷 011 期
页码： 2148-2156
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： [目的]构建多拷贝整合表达禽流感病毒样颗粒的重组巴斯德毕赤酵母,为H5 N1亚型禽流感基因工程疫苗提供基础.[方法]以巴斯德毕赤酵母GS115株18S rRNA基因(rDNA)部分序列,插入pPIC9K载体上XbaⅠ和Bsp1407Ⅰ位点间,构建多拷贝整合表达质粒p8K.再以禽流感病毒H5N1毒株基因组RNA为模板,RT-PCR扩增HA、M和NA基因,分别插入多拷贝载体p8K,构建表达质粒p8K-HA/M/NA.表达质粒分别扩增后线性化,按比例混合,电转化GS115感受态细胞.增菌后,经遗传霉素G418抗性平板筛选、PCR鉴定携带HA、M和NA基因序列的多拷贝整合菌株.阳性菌株增菌、诱导表达、高压均质破碎后,Western-blot检测表达产物.[结果]PCR鉴定阳性的重组菌株,其细胞裂解蛋白,免疫印迹试验可检测到与HA、M1和NA分子量一致的蛋白条带;电子显微镜可观察到大小约为80~120 nm的病毒样颗粒,免疫鸡能产生抗禽流感病毒中和抗体.[结论]重组毕赤酵母能够多拷贝整合、表达、组装禽流感病毒样颗粒.
- 相关文献
作者其他论文 更多>>
-
G8型牛轮状病毒VP7基因克隆及生物信息学分析
作者：苗书魁;米晓云;魏婕;魏玉荣;海力且木·买买提依明
关键词：牛轮状病毒(BRV);VP7基因;克隆;生物信息学
-
一例牛源产气荚膜梭菌的分离鉴定和药敏试验
作者：宫震;付修龙;金映红;薛晶;李月;张凌;夏俊
关键词：分离鉴定;产气荚膜梭菌;药敏试验
-
日粮中添加鞣花酸对乳鸽生长发育和屠宰性能的影响
作者：刘佳佳;韩涛
关键词：鞣花酸;乳鸽;生长发育;屠宰性能
-
绵羊源荚膜血清D型多杀性巴氏杆菌的生物学特性及2种候选疫苗的免疫效果评价
作者：汪阳;张凌;金映红;汪萍;薛晶;梁芊芊;李晓卓;郑启铭;刘文锴;韩翔舒;夏俊
关键词：绵羊;荚膜血清D型;多杀性巴氏杆菌;生物学特性;灭活疫苗;OmpH蛋白;重组疫苗
-
中草药制剂对肉鸽生长性能、血清抗氧化性能及肠道消化酶活性的影响
作者：刘佳佳;张霞;杨新平;梁金超;秦星;韩涛;代金平;王志方
关键词：中草药制剂;肉鸽;生长性能;血清抗氧化指标;免疫指标
-
犊牛腹泻症的病原学检测及鉴定
作者：苗书魁;王俊伟;陆桂丽;汪萍;王杰;魏玉荣;魏婕;米晓云;沙依兰·卡依扎
关键词：犊牛腹泻;病原学;检测;鉴定
-
布鲁氏菌病抗体检测方法的效果评价
作者：陆桂丽;陈古丽;王陆宝;参都哈西;哈力旦木;薛晶;韩涛;叶尔江;伊力哈木;艾沙江;王杰
关键词：布鲁氏菌病;抗体;敏感性;特异性;符合率
