文献类型： 中文期刊
作者： 袁枫 1 ; 陈磊 2 ; 玛依拉 2 ; 李文蓉 2 ;
作者机构： 1.新疆农业大学农学院
2.新疆畜牧科学院生物技术研究所
关键词： Spry4基因;美利奴羊;真核表达
期刊名称： 西北农业学报
ISSN： 1004-1389
年卷期： 2015 年 24 卷 09 期
页码： 16-22
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 为探究Spry4在绵羊毛囊发育过程中的作用,以美利奴羊皮肤组织总RNA的反转录产物为模板,采用PCR技术扩增获得Spry4基因全长编码区,并克隆至pCRTMBluntⅡ-TOPT@vector载体进行测序。随后将ToPo-Spry4亚克隆至pcDNA3.0真核表达载体,再经脂质体转染至293T细胞表达,通过Western Blot鉴定表达产物,分析Spry4核酸和氨基酸序列。结果表明,首次克隆获得绵羊Spry4基因编码序列(GenBank登录号KP280032),序列长954bp,编码298个氨基酸,与其他哺乳动物氨基酸同源性达91%以上;预测Spry4蛋白不存在信号肽和跨膜结构域;Western Blot检测显示,重组表达的蛋白分子质量为36ku,与预期一致。
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