文献类型： 中文期刊
作者： 张立民 1 ; 傅玉才 1 ; 由弘 2 ; 王进成 2 ;
作者机构： 1.汕头大学医学院寄生虫学教研室
2.新疆畜牧科学院兽医研究所
关键词： 细粒棘球绦虫;EgA31融合蛋白;疫苗
期刊名称： 寄生虫与医学昆虫学报
ISSN： 1005-0507
年卷期： 2003 年 10 卷 03 期
页码： 134-138
摘要： 目的 :构建细粒棘球绦虫疫苗候选分子EgA31重组质粒 ,表达及纯化EgA31 GST融合蛋白 ,为疫苗的研究奠定基础。方法 :PCR扩增EgA31cDNA ,将得到的cDNA经限制性内切酶酶切 ,然后亚克隆入pGEX 5X 3质粒 ,转化BL2 1宿主菌 ,IPTG诱导重组质粒的表达 ,亲和层析纯化表达产物 ,Bradford法测定重组蛋白含量 ,用SDS PAGE和Westernblot进行分析鉴定。结果 :SDS PAGE显示分离纯化的EgA31 GST融合蛋白为 4 5kDa ,测序检验重组质粒中EgA31cDNA序列正确。EgA31 GST融合蛋白免疫豚鼠得到的抗血清可与细粒棘球绦虫原头蚴总蛋白在 6 6kDa处特异性反应。结论 :EgA31 GST融合蛋白获得高效表达 ,并成功纯化 ,初步实验证明具有良好的免疫原性 ,可用于进一步疫苗的免疫注射实验
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