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口蹄疫病毒O型OHM/02株全长cDNA感染性克隆的构建

文献类型： 中文期刊

作者： 苗书魁 1 ; 魏玉荣 2 ; 魏婕 2 ; 米晓云 2 ; 汪萍 2 ; 马文戈 2 ; 王延 2 ; 薛英 2 ; 易忠 2 ; 黄炯 3 ;

作者机构： 1.新疆畜牧科学院兽医研究所/新疆畜牧科学院动物临床医学研究中心;天康生物股份有限公司

2.;新疆畜牧科学院兽医研究所/新疆畜牧科学院动物临床医学研究中心;天康生物股份有限公司

3.;新疆畜牧科学院兽医研究所/新疆畜牧科学院动物临床医学研究中心;天康生物股份有限公司;

关键词： 口蹄疫病毒;全长cDNA;转染;病毒拯救

期刊名称： 动物医学进展

ISSN： 1007-5038

年卷期： 2018 年 01 期

页码： 1-6

收录情况： 北大核心

摘要： 为构建O型口蹄疫病毒(FMDV)的感染性克隆,采用RT-PCR将O型FMDV OHM/02株全长基因组分为5个重叠的片段进行扩增,克隆至载体pUC57中,获得全长cDNA克隆pPO-1。将线性化的pPO-1与含有编码T7 RNA聚合酶的真核表达重组质粒共转染BHK-21细胞,出现致细胞病变效应(CPE)。对拯救的病毒进行RT-PCR扩增、酶切、测序,表明人工设计的分子标记Bam HⅠ酶切位点消失,排除了亲本毒株污染的可能性。间接免疫荧光试验可以检测到绿色荧光,电镜观察可观察到病毒粒子,表明构建了具有感染性的OHM/02毒株全长cDNA克隆。病毒生长曲线表明,拯救病毒与亲本病毒的复制能力和增殖特性相似。OHM/02株全长cDNA感染性克隆的构建及拯救可为FMDV致病机理的研究提供一种重要工具,可促进疫苗的研发。

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