文献类型： 中文期刊
作者： 朱研 1 ; 苗书魁 2 ; 马文戈 2 ; 李金娜 2 ; 魏玉荣 2 ; 汪萍 2 ; 魏婕 2 ; 米晓云 2 ; 黄炯 3 ;
作者机构： 1.新疆农业大学动物医学学院;新疆畜牧科学院兽医研究所/新疆畜牧科学院动物临床医学研究中心
2.;新疆农业大学动物医学学院;新疆畜牧科学院兽医研究所/新疆畜牧科学院动物临床医学研究中心
3.;新疆农业大学动物医学学院;新疆畜牧科学院兽医研究所/新疆畜牧科学院动物临床医学研究中心;
关键词： 口蹄疫病毒;常规PCR;5’端序列;基因扩增
期刊名称： 新疆农业科学
ISSN： 1001-4330
年卷期： 2018 年 03 期
页码： 572-580
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 【目的】扩增口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)基因组5’端序列,为获得基因组全长准备基础。【方法】将FMDV O/Akesu/58 CE39A株液氮冻存基因组RNA反转录三次,对c DNA的5’端序列进行扩增、克隆、测序。【结果】以c DNA1与c DNA3为模板,用LA Taq DNA polymerase、EX Taq DNA polymerase、Prime STARHS DNA polymerase及3对引物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均未扩增出5’端目的片段;以c DNA2为模板,用LA Taq DNA polymerase为扩增酶,两对引物Ⅰ、Ⅱ均能扩增出5’端目的片段,且所测得的序列长度787 bp、797 bp与参考序列核苷酸同源性分别为86.2%和86.3%。【结论】常规PCR法扩增5’端序列较其它技术具有价格便宜、操作简便等优点,但扩增成功率偏低。试验共进行了72次PCR,成功率为6/72,说明FMDV 5’端序列的扩增难度大,应合理设计反转录引物和扩增引物。为许多RNA病毒反向遗传学研究提供了更多的选择。
- 相关文献
[1]牛早期胚胎性别鉴定PCR反应体系的优化研究. 陈从英,黄路生,陈静波,任军,肖海霞. 2003
[2]口蹄疫病毒非结构蛋白3AB、3A基因的克隆与原核表达. 张先锋,易忠,魏玉荣,胡尔玛西,符子华. 2010
[3]国内单克隆抗体在口蹄疫检测中的应用. 金映红,苗书魁,魏玉荣,汪萍,魏婕,夏俊,木克热木,米晓云. 2017
[4]口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC基因的克隆与原核表达. 张先锋,易忠,魏玉荣,符子华,胡尔玛西. 2010
[5]口蹄疫病毒表位嵌合蛋白在枯草芽胞杆菌中的分泌表达. 任晓冰,窦小龙,魏婕,苗书魁,冉多良. 2014
[6]靶向口蹄疫病毒shRNA表达载体转染后特异性siRNA的分子检测. 蔡扩军,孟庆玲,乔军,陈创夫,马饰委,黄炯,张再超,田振中,杨丽红. 2013
[7]口蹄疫病毒VP1基因的原核可溶性表达. 王海烽,易忠,魏玉荣,魏婕,胡尔马西,符子华. 2009
[8]IPTG诱导浓度、时间对AsiaⅠ型口蹄疫病毒VP1蛋白表达的影响. 魏婕,易忠,魏玉荣,王海烽,胡尔玛西,符子华,冉多良. 2009
[9]口蹄疫病毒反向遗传技术研究进展. 任方,易忠,郭会玲,魏玉荣,马文戈,黄炯. 2014
[10]口蹄疫病毒VP1基因研究进展. 朱晶晶,魏玉荣,符子华,易忠. 2008
[11]口蹄疫病毒O型OHM/02株全长cDNA感染性克隆的构建. 苗书魁,魏玉荣,魏婕,米晓云,汪萍,马文戈,王延,薛英,易忠,黄炯. 2018
[12]口蹄疫病毒基因组3'末端序列扩增及分析. 李金娜,苗书魁,马文戈,魏玉荣,汪萍,夏俊,陆桂丽,米晓云,沙依兰·卡依扎,王延,魏婕,黄炯. 2018
[13]O型口蹄疫病毒不同宿主适应毒3A基因序列分析. 姚怀兵,赵毅,朱妍,张毅,刘宏,任方,黄炯. 2017
[14]口蹄疫病毒灭活疫苗中VP1基因RNA抽提方法的建立. 赵毅,雷震,王玉红,刘宏,马文戈,黄炯,符子华,易中,薛英. 2009
[15]O型口蹄疫病毒VP1基因在2种原核表达载体上的表达. 王海烽,易忠,魏玉荣,胡尔马西,符子华. 2009
[16]口蹄疫病毒P1结构蛋白和3A非结构蛋白研究进展. 姚怀兵,赵毅,李金娜,刘宏,任方,黄炯. 2017
[17]口蹄疫病毒3C蛋白酶结构与功能及应用研究进展. 姚怀兵,赵毅,刘梦丽,朱妍,刘宏,任方,黄炯. 2017
[18]BHK-21细胞的悬浮驯化及其悬培条件下对口蹄疫A型病毒的培养. 薛英,徐亚萍,王延,王玉红,黄炯,鲁立柱,马文戈,夏培倍,刘宏,郭惠玲. 2007
作者其他论文 更多>>
-
犊牛腹泻症的病原学检测及鉴定
作者：苗书魁;王俊伟;陆桂丽;汪萍;王杰;魏玉荣;魏婕;米晓云;沙依兰·卡依扎
关键词：犊牛腹泻;病原学;检测;鉴定
-
新疆和田地区鹅细小病毒感染调查及VP1基因遗传进化分析
作者：肖海侠;马万鹏;王燕;马雪连;米晓云;刘黎;苏战强
关键词：和田地区;鹅细小病毒;流行病学调查;VP1基因;遗传进化分析
-
山羊环鸟苷酸-腺苷酸合成酶的原核表达及其酶活性分析
作者：韦雨松;张艳;田慧慧;翟军军;陈国华;房永祥;景志忠;屈雷;米晓云;何小兵
关键词：环鸟苷酸-腺苷酸合成酶;环鸟苷酸-腺苷酸;原核表达;蛋白纯化;酶活性
-
绵羊肺炎支原体研究进展
作者：魏婕;张妤;米晓云;魏玉荣;郑文新
关键词：绵羊肺炎支原体;流行病学;毒力;抗病育种
-
新疆动物源携带blaCTX-M且对多黏菌素耐药大肠杆菌的耐药性及传播特性
作者：王芋丹;王昊蕊;王磊;队森·木拉力别克;苏战强;谢金鑫;米晓云;佟盼盼
关键词：携带blaCTX-M大肠杆菌;多黏菌素耐药;流行特征;动物;新疆
-
绵羊源荚膜血清D型多杀性巴氏杆菌的生物学特性及2种候选疫苗的免疫效果评价
作者：汪阳;张凌;金映红;汪萍;薛晶;梁芊芊;李晓卓;郑启铭;刘文锴;韩翔舒;夏俊
关键词：绵羊;荚膜血清D型;多杀性巴氏杆菌;生物学特性;灭活疫苗;OmpH蛋白;重组疫苗
-
2021-2022年赤羽病通过牛羊调运传入山东省的定量风险评估研究
作者：李超;沈朝建;魏玉荣;张祯涛;王玉英;张毅;何微;黄克和;薛峰
关键词：赤羽病;定量风险评估;调运;隔离检疫
