文献类型： 中文期刊
作者： 苗书魁 1 ; 汪萍 1 ; 魏玉荣 1 ; 陆桂丽 1 ; 米晓云 1 ; 夏俊 1 ; 沙依兰·卡依扎 1 ; 魏婕 1 ; 王延 1 ; 李金娜 1 ; 马文戈 1 ; 黄炯 1 ;
作者机构： 1.新疆畜牧科学院兽医研究所(新疆畜牧科学院动物临床医学研究中心);新疆农业大学动物医学学院
关键词： 小反刍兽疫病毒;N蛋白;原核表达;反应活性
期刊名称： 中国微生态学杂志
ISSN： 1005-376X
年卷期： 2019 年 01 期
页码： 30-34
收录情况： CSCD
摘要： 目的探讨小反刍兽疫病毒(Peste des Petits Ruminants Virus,PPRV)N蛋白原核表达、条件优化及反应活性。方法参照GenBank中PPRV (Nigeria/75/1)N基因序列,人工合成该基因,构建重组表达质粒pET-30a (+)-N,转化至BL21 (DE3)感受态细胞,IPTG诱导表达,进行SDS-PAGE电泳、Western-blot分析。在不同温度、时间、IPTG浓度条件下诱导表达N蛋白,确定最佳表达条件。结果 PPRV N蛋白(64.4kD)成功表达,能被羊PPRV免疫血清所识别。N蛋白主要以包涵体存在,其最佳诱导条件:诱导温度28℃、IPTG终浓度2.0mmol/L、诱导时间16h。结论原核表达的PPRV N蛋白具有良好的特异性和反应活性,为单克隆抗体的制备及快速诊断方法的建立提供了技术资料。
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