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脂质体介导法转染体细胞效率的优化

文献类型： 中文期刊

作者： 侯颖 1 ; 李文蓉 1 ; 谭立新 1 ; 牛志刚 1 ;

作者机构： 1.新疆畜牧科学院农业部家畜繁育生物技术重点开放实验室

关键词： 脂质体;转染效率;体细胞;增强型绿色荧光蛋白

期刊名称： 黄牛杂志

ISSN： 1001-9111

年卷期： 2005 年 31 卷 02 期

页码： 18-20+24

摘要： 为建立脂质体介导的高效体细胞转染体系,采用脂质体TransfastTM包裹编码增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的pCMV-EGFP质粒,转染5～13代山羊胎儿成纤维细胞,并用流式细胞仪检测不同DNA剂量、细胞汇合度、血清、转染时间及脂质体与DNA比例等参数对转染效率的影响。实验发现0.75μgDNA按1∶1的脂质体与DNA比例,在无血清条件下转染汇合50%细胞3h,转染效率最高可达40.7%±5%。4h转染时间、细胞汇合80%及转染体系中有血清会降低转染效率。随着DNA剂量的增加,转染效率呈剂量依赖性增高,但山羊成纤维细胞的活细胞数显著下降。实验表明TransfastTM能高效安全地介导外源基因转染山羊成纤维细胞。

  • 相关文献

[1]动物的克隆. 史洪才,王立虎. 2001

[2]靶向O型口蹄疫病毒shRNA转基因猪体细胞抗病毒活性研究. 蔡扩军,马铈委,乔军,孟庆玲,陈创夫,黄炯,张再超,杨海波. 2013

[3]美国家畜繁育生物技术研究动态与发展趋势——2002年中美农业科技交流与合作第六项目组赴美考察报告. 郭志勤,刘明军,李文蓉,杨梅. 2003

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