文献类型： 中文期刊

作者： 魏玉荣 ¹ ; 易忠 ¹ ; 符子华 ¹ ; 马素贞 ² ; 简子健 ² ; 胡尔玛西 ¹ ; 王海烽 ¹ ; 魏婕 ¹ ; 朱晶晶 ³ ;

作者机构： 1.新疆畜牧科学院兽医研究所

2.新疆农业大学动物医学学院

3.塔里木大学

关键词： 狂犬病病毒;胞质区;Ψ区;同源重组;人细胞色素C基因;反向遗传学

期刊名称： 新疆农业科学

ISSN： 1001-4330

年卷期： 2010 年 47 卷 06 期

页码： 1236-1241

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】利用反向遗传学技术在DNA水平上构建了狂犬病病毒修饰基因组。【方法】提取狂犬病病毒(Rabies Virus,RV)口服疫苗株SRV9基因组总RNA作为RT-PCR的扩增模板,并根据GenBank已发表的SRV9基因组序列设计引物,缺失狂犬病基因组Ψ区并在缺失位置插入人细胞色素C基因,再设计引物删除糖蛋白(G)胞质区(CD区)。缺失Ψ区及删除CD区时采用基因同源重组的方法进行。在缺失的Ψ区插入人细胞色素C基因时,利用引物引入酶切位点NheI和EcoRI,用PCR扩增出人细胞色素C基因并插入NheI和EcoRI位点。【结果】获得含预期的人细胞色素C基因,同时缺失了CD区与Ψ区的质粒pBSK-LA。【结论】全基因组测序结果表明已成功构建了狂犬病病毒修饰基因组。