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利用SMART技术构建新吉细毛羊皮肤组织全长cDNA文库

文献类型： 中文期刊

作者： 吴茜 1 ; 田可川 2 ; 刘武军 3 ; 张艳花 2 ; 吴伟伟 2 ;

作者机构： 1.新疆畜牧科学院畜牧所新疆农业大学动物科学学院新疆巩乃斯种羊场

2.新疆畜牧科学院

3.新疆农业大学动物科学学院

关键词： 新吉细毛羊;皮肤组织;cDNA文库;SMART技术

期刊名称： 西北农林科技大学学报(自然科学版)

ISSN： 1671-9387

年卷期： 2010 年 38 卷 05 期

页码： 46-50+55

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】探寻控制羊毛性状的相关基因,构建了新吉细毛羊皮肤组织全长cDNA文库。【方法】采用Clontech公司的CreaterTM SMARTTM cDNA library construction kit,用Biozol试剂提取新吉细毛羊皮肤组织总RNA后,以反转录酶SuperscriptTMⅡ反转录为第一链cDNA,然后通过LD-PCR合成并扩增ds cDNA,扩增产物经纯化、SfiⅠ酶切、过CHROMA SPIN-400柱去除小片段后,连接到SfiⅠ消化过的pDNR-LIB(带有SfiⅠA和B 2个位点)质粒载体中,最后用热击转化法将重组质粒转化到E.coliDH5α内,得到新吉细毛羊皮肤组织全长cDNA原始文库,扩增后的文库分装后用50 mL离心管保存。【结果】构建的cDNA文库约含4.2×105个独立克隆,重组效率为100%,插入片段多为0.5~3.0 kb,平均插入片段长度为1.3 kb,符合建库要求。【结论】经检测所构建的文库库容量满足基因筛选要求,可用于特异表达基因全长序列。

  • 相关文献

[1]新吉细毛羊皮肤组织均一化全长cDNA文库的质量评价. 詹振宏,黄锡霞,田可川,吴伟伟,哈尼克孜·吐拉甫,田月珍,马依拉·吐尔逊,艾买提·买买提,何丽. 2013

[2]新吉细毛羊皮肤组织均一化全长cDNA文库的构建及其ESTs的生物信息学分析. 吴茜,黄锡霞,田可川,刘武军,张艳花,吴伟伟,邵勇刚. 2011

[3]中国美利奴羊羊毛弯曲相关microRNA的筛选. 于丽娟,张艳花,拉扎特·艾尼瓦尔,徐新明,玛尔孜娅·亚森,狄江. 2021

[4]不同毛色ASIP基因编辑中国美利奴细毛羊皮肤组织中黑色素分布及ASIP蛋白的表达定位. 邓雅迪,张雪梅,王旭光. 2024

[5]角蛋白26基因在超细型和细型细毛羊皮肤组织中的表达差异. 田月珍,狄江,吴伟伟,田可川,黄锡霞,徐新明,哈尼克孜·吐拉甫,付雪峰,张艳花,马依拉·吐尔逊,艾买提·买买提. 2012

[6]非遗传因素对新吉细毛羊主要经济性状的影响. 关鸣轩,李进龙,杨存明,魏趁,陈雪艳,杜桂琼,徐新明,付雪峰,佀博学,田可川,黄锡霞. 2020

[7]非遗传因素对超细型细毛羊初生重的影响. 杨存明,张漫,关鸣轩,魏趁,李进龙,杜桂琼,陈雪艳,邓亚迪,黄锡霞,田可川. 2022

[8]利用DDRT-PCR技术筛选新疆超细型细毛羊毛用性状相关基因. 劳荃蘅,黄锡霞,田可川,徐新明,贺三刚,汤存伟. 2009

[9]细粒棘球绦虫免疫相关抗原基因的筛选及原核表达. 刘原源,安红燕,杨爽,王晓岑,宫鹏涛. 2016

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