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绵羊基质Gla蛋白基因克隆、表达谱及其在卵巢组织的定位

文献类型: 中文期刊

作者: 张欣如 1 ; 古丽米热·阿不都热依木 1 ; 陈莹 1 ; 马秀玲 2 ; 林嘉鹏 1 ; 汪立芹 1 ; 黄俊成 1 ; 吴阳升 1 ;

作者机构: 1.农业农村部草食家畜遗传育种与繁殖重点实验室/新疆动物生物技术重点实验室/新疆畜牧科学院生物技术研究所

2.新疆农业大学动物科学学院

关键词: 基质Gla蛋白;绵羊;卵巢;颗粒细胞;黄体

期刊名称: 江苏农业学报

ISSN: 1000-4440

年卷期: 2024 年 40 卷 007 期

页码: 1276-1284

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 本研究旨在克隆绵羊基质Gla蛋白(MGP)基因的蛋白质编码序列(CDS),制备特异抗体,并检测该基因在绵羊卵巢组织中的表达分布。以卵泡总cDNA为模板,扩增获得绵羊MGP基因CDS区全长序列;合成绵羊MGP蛋白C末端15个氨基酸长度的多肽,免疫小鼠,制备抗血清;利用实时荧光定量PCR(qPCR)和免疫印迹技术分析其在不同组织和不同大小的卵泡中的表达水平;通过免疫组织化学方法分析其在卵巢组织中的表达分布特征。结果表明,成功获得绵羊MGP基因的CDS区全长片段(467 bp),编码103个氨基酸,理论相对分子量为12 230.96,等电点为9.27;N末端19个氨基酸序列被预测为信号肽序列,成熟肽有84个氨基酸,为外泌性蛋白质,无胞内区;MGP总蛋白质氨基酸序列与山羊、牛的同源蛋白质相似性分别为100.0%、99.0%,与人、小鼠的相似性均为85.4%。MGP mRNA和蛋白质在绵羊心、肝、脾、肺、肾等组织中的相对表达量较低,在卵巢、输卵管、子宫等生殖系统或组织中的相对表达量较高,在黄体中的相对表达量也较高;MGP在卵巢组织颗粒细胞、卵丘细胞中均有表达,但在闭锁卵泡中不表达。本研究结果可为进一步研究MGP在卵巢组织中的生物学功能提供参考。

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