文献类型： 中文期刊

作者： 张云峰 ¹ ; 刘福元 ² ; 蔡宏 ² ; 呼西旦 ² ; 宋振忠 ² ; 徐雪萍 ² ;

作者机构： 1.新疆农垦科学院畜牧兽医研究所

2.新疆农垦科学院畜牧兽医研究所;北京大学生命科学学院;新疆畜牧科学院兽医研究所

关键词： 结核分枝杆菌;阴离子交换色谱;DNA疫苗;免疫应答

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2011 年 11 期

页码： 1154-1159

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为研究结核分枝杆菌Ag85B、MPT64和MPT83抗原DNA疫苗在奶牛体内诱导的免疫应答,以PJW4303为载体,构建了上述3种抗原基因的三价DNA疫苗。采用阴离子交换色谱方法提取3种质粒,混合后添加佐剂DDA免疫3月龄荷斯坦奶牛3次,采用ELISA法检测免疫奶牛的特异性抗体效价。利用双抗夹心ELISA定量测定免疫奶牛各月的IFN-γ浓度。结果显示,纯化后的DNA疫苗经质量检验达到动物免疫试验的要求;免疫前奶牛体内特异性抗体为阴性;三免后第30天MPT83、Ag85B和MPT64特异性抗体效价达到最高,均值分别为1∶3 200、1∶2 560和1∶2 880;同时免疫奶牛MPT83、Ag85B、MPT64三种蛋白诱导产生的IFN-γ在三免后第30天达到最高,分别为(630.25±94.45)、(341.65±76.75)、(51.38±9.80)pg/mL,阴性对照组PBS的IFN-γ浓度为(6.48±20.88)pg/mL。每个月的阴性对照与3种抗原相比,差异均极显著(P<0.01)。证实该三价核酸疫苗能同时诱导机体产生细胞免疫应答和体液免疫应答,可能有利于增强疫苗对结核病的抗性。