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狂犬病病毒SRV_9株修饰全长基因组cDNA克隆的构建

文献类型： 中文期刊

作者： 魏玉荣 1 ; 易忠 1 ; 符子华 1 ; 马素贞 2 ; 简子健 2 ;

作者机构： 1.新疆畜牧科学院兽医研究所

2.新疆农业大学动物医学学院

关键词： 狂犬病病毒SRV9株;修饰基因组;全长基因质粒构建

期刊名称： 新疆农业大学学报

ISSN： 1007-8614

年卷期： 2010 年 33 卷 05 期

页码： 416-421

收录情况： 北大核心

摘要： 为获得狂犬病病毒(rabies virus,RV)SRV9株的基因组全长cDNA克隆并对其进行基因修饰,深入研究狂犬病病毒的基因组特性及构建新型病毒载体,本研究根据GenBank中公布的SRV9基因组序列设计数对引物,以SRV9病毒为材料,从病毒总RNA中将全长基因组11 928 bp分5段扩增,克隆至载体测序鉴定。测序正确后,设计引物缺失基因组Ψ区并在缺失位置插入人细胞色素C基因,又设计引物删除糖蛋白(G)胞质区(CD区)。利用引物在病毒基因组起始处添加锤头状核酶序列,在病毒序列结尾处添加了丁型肝炎核酶序列。再次测序后克隆至pcDNA3.1(+)载体,利用扩增片段自身内切酶位点顺次进行修饰后全长连接,从而获得含修饰SRV9全长基因组的质粒pcDNA3.1-SRV9,为RV感染性克隆的建立奠定了基础。

  • 相关文献

[1]狂犬病病毒口服疫苗株SRV_9全长基因质粒的构建. 魏玉荣,易忠,符子华,马素贞,王晓萍,简子健,王海烽,魏婕. 2009

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