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口蹄疫病毒表位嵌合蛋白在枯草芽胞杆菌中的分泌表达

文献类型： 中文期刊

作者： 任晓冰 1 ; 窦小龙 1 ; 魏婕 2 ; 苗书魁 3 ; 冉多良 4 ;

作者机构： 1.新疆农业大学动物医学学院新疆畜牧科学院兽医研究所

2.新疆畜牧科学院兽医研究所

3.新疆喀什地区动物疾病控制与诊断中心

4.新疆农业大学动物医学学院

关键词： 口蹄疫病毒;表位嵌合蛋白;猪圆环病毒2型;枯草芽胞杆菌

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2014 年 03 期

页码： 287-292

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了将口蹄疫病毒(FMDV)中和表位展示在病毒样颗粒(VLP)表面,以猪圆环病毒2型(PCV2)衣壳蛋白为骨架,用FMDV O/Mya-98/2010毒株G-H环替换PCV2自身中和表位,构建嵌合衣壳蛋白CaO。为分泌表达CaO蛋白,在芽胞杆菌穿梭质粒pHCMC05的多克隆位点中顺次插入枯草芽胞杆菌P43启动子和中性蛋白酶B分泌信号肽(nprBsp),构建分泌型大肠杆菌-枯草芽胞杆菌穿梭质粒p7257-P43。然后将合成的CaO基因插入p7257-P43质粒nprBsp的下游,构建分泌表达质粒p7257-P43-CaO。将该质粒转化枯草芽胞杆菌WB800,氯霉素诱导表达。上清经SDS-PAGE检测,嵌合蛋白CaO在枯草芽胞杆菌中得到表达。Western-blot证实,该蛋白具有反应原性。免疫电镜可观察到直径约15nm±2nm的VLP,表明嵌合蛋白在体外能有效组装。

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