文献类型： 中文期刊
作者： 刘志龙 1 ; 袁枫 2 ; 贺三刚 2 ; 李文蓉 2 ; 贾斌 1 ;
作者机构： 1.新疆石河子大学动物科技学院
2.新疆畜牧科学院中国-澳大利亚绵羊育种研究中心
关键词： BMP4基因;中国美利奴羊;序列分析;真核表达
期刊名称： 石河子大学学报(自然科学版)
ISSN： 1007-7383
年卷期： 2014 年 32 卷 06 期
页码： 698-704
摘要： 本实验利用RT-PCR技术获得妊娠105 d胎羊皮肤组织c DNA,PCR扩增获得中国美利奴羊BMP4基因全长编码区序列(CDS),将其克隆到zero PCR@TM-Blunt载体进行测序验证。获得的BMP4基因亚克隆至pc DNA3.1载体,构建绵羊BMP4真核表达载体,经脂质体2000转染293T细胞进行BMP4重组蛋白表达,Western blot鉴定表达产物。结果表明:中国美利奴羊BMP4基因编码区包含1227 bp,编码409个氨基酸,与其它哺乳动物氨基酸相似性达到92%,其成熟肽羧基末端区域具有TGFβ家族保守区结构。Western blot结果显示,重组蛋白分子量约为47KD,与预期一致,并证实人源BMP4单克隆抗体能够应用于羊BMP4研究。这为进一步的研究奠定了必要基础。
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