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Mg_2Al-Cl-LDH载体转染细胞的研究

文献类型: 中文期刊

作者: 刘莉 1 ; 林嘉鹏 2 ; 吴阳升 3 ; 汪立芹 4 ; 田永芝 5 ; 黄俊成 4 ;

作者机构: 1.新疆农业大学农学院

2.新疆畜牧科学院生物技术研究中心

3.新疆维吾尔自治区动物生物技术重点开放实验室

4.农业部草食家畜繁育生物技术重点开放实验室

5.新疆畜牧科学院生物技术研究中心新疆维吾尔自治区动物生物技术重点开放实验室

关键词: Mg2Al-Cl-LDH纳米颗粒;基因转染;载体

期刊名称: 江苏农业学报

ISSN: 1000-4440

年卷期: 2013 年 29 卷 05 期

页码: 1102-1106

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为探讨Mg2Al-Cl-LDH颗粒作为基因转染载体的可能性以及最优的转染体系和转染时间,为后续的基因治疗、创面修复、转基因技术等试验打下基础,自制Mg2Al-Cl-LDH纳米颗粒,与增强型荧光蛋白质基因eGFP结合后,转染入细胞,观察转染后细胞表达的绿色荧光蛋白质,计算转染率。结果表明Mg2Al-Cl-LDH纳米颗粒直径在100 nm左右,结构为六边形。200μg/ml的纳米颗粒浓度下细胞活性为87%,达到500μg/ml时细胞活性快速降至44%;DNA与LDH的质量比为4/50时转染率达到11.17%,质量比为10/50时,转染效率为3.93%;DNA与LDH作用时间在15 min时转染率为6.93%,30 min时反而下降至4.8%;转染细胞培养24 h时转染率达到17.4%,72 h后下降至3.7%。纳米颗粒的分子较小,比较容易被细胞膜胞吞,并且Mg2Al-Cl-LDH纳米颗粒能有效地与eGFP质粒相结合;在DNA与LDH质量比4/50的情况下,结合能力最高;最佳结合时间为15 min;转染时间在48 h时效果最好。HEK 293T细胞对Mg2Al-Cl-LDH纳米颗粒的最优耐受浓度为200μg/ml;同样条件下C2C12细胞的转染效率比HEK 293T细胞的转染效率高。

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[2]O型口蹄疫病毒VP1基因在2种原核表达载体上的表达. 王海烽,易忠,魏玉荣,胡尔马西,符子华. 2009

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