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利用锌指核酸酶敲除绵羊肌肉抑制素基因的方法

专利类型： 中国发明申请

专利权人： 新疆维吾尔自治区畜牧科学院中国-澳大利亚绵羊育种研究中心

发明人： 刘明军;张雪梅;李文蓉;张宁;贺三刚;刘晨曦;玛依拉

专利号： CN201310159422.9

摘要： 本发明公开了一种锌指核酸酶定点删除绵羊肌肉抑制素基因的方法，其针对绵羊Myostatin基因外显子3设计了识别39bp的特异靶位点序列，并构建锌指核酸酶质粒，将该质粒转染绵羊成纤维细胞，获得可以定点删除95bp和113bp的双等位基因删除的单克隆细胞，表明锌指核酸酶定点删除Myostatin基因特异靶位点序列能够准确删除Myostatin基因外显子3并能准确分选出Myostatin基因被定点删除的细胞，证实了该序列的有效性，且获得删除的单克隆细胞无需抗生素筛选，兼顾了基因组靶向修饰和安全性两大优点，对培育无抗性标记基因、安全高效的转基因绵羊具有重要意义。

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