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一种以RNA介导的特异性敲除双基因获得基因编辑绵羊的方法及其专用sgRNA

专利类型: 中国发明申请

专利权人: 新疆畜牧科学院生物技术研究所

发明人: 刘明军;张雪梅;彭新荣;吴阳升;林嘉鹏;刘晨曦;贺三刚;李文蓉

专利号: CN201510605602.4

摘要: 本发明公开了一种以RNA介导的特异性敲除双基因获得基因编辑绵羊的方法及其专用sgRNA。本发明的sgRNA组合由sgRNAMSTN‑1和sgRNAFGF5‑1组成;sgRNAMSTN‑1为能特异靶向修饰绵羊MSTN基因的sgRNA,为序列6第2至21位核苷酸所示的RNA或具有序列6第2至21位核苷酸的RNA;sgRNAFGF5‑1为能特异靶向修饰绵羊FGF5基因的sgRNA,为序列8第2至21位核苷酸所示的RNA或具有序列8第2至21位核苷酸的RNA。本发明将CRISPR/Cas9基因组编辑技术与显微注射技术相结合,不仅使绵羊打靶效率更高更准确,而且在一个世代内首次实现了绵羊双基因敲除,大大促进了绵羊产肉、产毛双性能的改良,为绵羊新品种培育提供了更为广阔的空间和更有效的技术工具。

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