科研产出
人结核病病原菌型的PCR指印分析
《西北农业学报 》 2000 CSCD
摘要：以结核分枝杆菌特异插入序列 IS61 1 0两端序列为模板 ,设计一对外向 PCR引物进行 PCR扩增 ,从而建立一种结核分枝杆菌的快速分子生物学分型技术 ,该试验的基础是利用 IS61 1 0在结核分枝杆菌染色体DNA中反复重复且 IS61 1 0序列之间相距较近 ,经 PCR扩增呈现多条带型构成 DNA指印。采用 PCR指印技术 ,对人结核病患者痰标本中的结核分枝杆菌进行分型 ,57份痰标本呈现 7种 PCR指印。该 PCR分型技术对结核分枝杆菌的分型所需时间短 ,不需细菌再培养、DNA纯化和酶切 ,萨瑟恩转印或核酸杂交等繁琐步骤。经过对 57份标本的检测 ,证明该法是一种快速、准确的鉴定与分析方法 ,并可直接进行分子流行病学研究
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PCR指印技术对新疆结核病病原Bacter460液体培养标本进行菌株分型
《中国人兽共患病杂志 》 2000 北大核心 CSCD
摘要：以结核分枝杆菌特异插入序列IS6 110两端序列为模板 ,设计一对外向PCR引物进行PCR扩增 ,从而建立一种结核分枝杆菌的快速分子生物学分型技术 ,该试验的基础是利用IS6 110在结核分枝杆菌染色体DNA中反复重复且IS6 110序列之间相距较近 ,经PCR扩增呈现多条带型构成DNA指印。在对新疆结核病人的 31份液体培养标本的PCR检测呈现 6种指印 ,该PCR分型技术对结核分枝杆菌的分型所需时间短 ,不需细菌再培养 ,DNA纯化和酶切、萨瑟恩转印或核酸杂交等繁琐步骤。证明该法是一种快速、准确的鉴定与分型方法并可直接进行分子流行病学研究
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人结核分枝杆菌特异性核酸探针制备及结核病PCR检测技术的初步临床应用
《生物工程学报 》 1996 北大核心 CSCD
摘要：采用人结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberulosis TB)染色体DNA为模板,选择位于插入片段IS6110中884～865和568～588碱基对处的两个片段为引物,扩增出317bp的特异性片段,将其克隆进pUC19载体。酶切图谱分析和DNA序列测定证实为目的片段。该片段经DIG标记,分别与11种分枝杆菌DNA进行Southern杂交,结果证明只与人型复合分枝杆菌发生杂交反应。利用该对引物建立的PCR检测技术对74份结核病痰液标本进行检测,并与临床细菌快速培养结果相比较,发现48份临床阳性均为PCR阳性,在26份临床阴性标本中亦发现11份PCR检测阳性。将标本PCR产物与克隆探针进行杂交,显示两者结果完全一致。说明PCR检测体系结果可靠,其灵敏度明显高于目前临床所采用的方法,可作为一种常规技术用于结核病的临床检测。
关键词： 人结核分枝杆菌 特异性核酸探针 PCR 结核病检测
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