牛结核分枝杆菌基因文库的构建

蔡宏; 陈东; 李淑霞; 呼西旦; 李君莲; 陈永福; 《中国预防兽医学报 》 1999 北大核心 CSCD

摘要：以国际标准牛型结核分枝杆菌（Ｍ．ｂｏｖｉｓ）ＴＭＣ４１０为材料，制备其总ＤＮＡ，经过限制性内切酶Ｓａｕ３Ａ部分消化后，纯化回收９～２５Ｋｂ片段，并将其用Ｔ４ＤＮＡ连接酶与经ＢａｍＨＩ酶切为粘性末端的ＬａｍｂｄａＥＭＢＬ３左右臂连接。用噬菌体包装蛋白包装，再进行连续稀释，然后将不同稀释度的噬菌体转移到宿主菌ＬＥ３９２。所获重组子为６×１０４，因为牛结核杆菌基因组大小约为４×１０６Ｋｂ则以９９％概率筛到任一基因，要求的重组子数为１．０８×１０３，故该基因文库已达到要求

关键词： 牛结核分枝杆菌,基因文库