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牛结核分枝杆菌基因文库的构建

文献类型： 中文期刊

作者： 蔡宏 1 ; 陈东 2 ; 李淑霞 2 ; 呼西旦 2 ; 李君莲 2 ; 陈永福 2 ;

作者机构： 1.新疆畜牧科学院兽医研究所

2.新疆畜牧科学院兽医研究所,中国农业大学农业生物技术实验室,新疆结核病研究所

关键词： 牛结核分枝杆菌,基因文库

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 1999 年 02 期

页码：

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以国际标准牛型结核分枝杆菌（Ｍ．ｂｏｖｉｓ）ＴＭＣ４１０为材料，制备其总ＤＮＡ，经过限制性内切酶Ｓａｕ３Ａ部分消化后，纯化回收９～２５Ｋｂ片段，并将其用Ｔ４ＤＮＡ连接酶与经ＢａｍＨＩ酶切为粘性末端的ＬａｍｂｄａＥＭＢＬ３左右臂连接。用噬菌体包装蛋白包装，再进行连续稀释，然后将不同稀释度的噬菌体转移到宿主菌ＬＥ３９２。所获重组子为６×１０４，因为牛结核杆菌基因组大小约为４×１０６Ｋｂ则以９９％概率筛到任一基因，要求的重组子数为１．０８×１０３，故该基因文库已达到要求

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