科研产出
犬细粒棘球绦虫粪抗原夹心ELISA检测方法的建立
《动物医学进展 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：为建立特异性和敏感性高的检验犬细粒棘球绦虫感染的方法。用细粒棘球绦虫(简称,Eg)成虫抗原分别免疫兔和绵羊,收集高免血清,纯化的高免抗体。依据抗体夹心ELISA工作原理,以兔抗体包被,检测感染Eg、不同犬带科绦虫的实验犬和空白犬粪样,绵羊抗体扑捉抗原,HRP标记兔抗绵羊IgG(1∶8 000)催化显色,用酶标仪测定OD 405nm吸光度,用以确定其特异性和敏感性。试验结果表明,敏感性为82.69%(43/52),特异性为85.88%(140/163);粪抗原在感染细粒棘球绦虫16d后可检出,最低抗原浓度为9.7ng/mL即犬感染5条成虫时可检测出阳性。该检测方法具有较好的特异性和灵敏性,为进一步研制检测细粒棘球绦虫虫体抗原ELISA检测试剂盒奠定了基础。
关键词： 细粒棘球绦虫 粪抗原 双抗夹心ELISA 特异性 敏感性
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细粒棘球绦虫高免动物血清的特异性和敏感性分析
《草食家畜 》 2011
摘要：目的获得用于诊断细粒棘球绦虫成虫感染时特异性和敏感性高的抗血清。方法用细粒棘球绦虫成虫抗原免疫兔2只,制备高免血清,血清用饱和硫酸铵沉淀、透析、获得比较纯化的抗体,测量浓度和效价后,3μg/ml兔抗体包被,检测感染了不同犬带科绦虫的实验犬和空白犬粪样,单克隆抗体补捉抗原(1∶6000),再用HRP标记的兔抗小鼠IgM(1∶2000),OD 405nm读值,用以判定兔高免血清的特异性和敏感性。结果高免血清抗体效价均为16万,其敏感性为85%(34/40),特异性为87.5%(42/48)。结论此高免血清可以用于建立高敏感性和高特异性的诊断细粒棘球绦虫成虫感染的ELISA方法的建立和优化。
关键词： 细粒棘球绦虫 高免血清 粪抗原 夹心法-ELISA
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用抗虫体表膜抗原抗体测定犬细粒棘球绦虫粪抗原
《畜牧兽医学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：利用Echinococcus granulosus(Eg)成虫表膜抗原抗体夹心ELISA方法检测犬细粒棘球绦虫感染的粪抗原。首先提取E g成虫表膜抗原,制备抗E g成虫表膜抗原的血清,然后用间接ELISA和Western blotting方法检测其抗原抗体反应及免疫原性,用间接免疫组化方法对E g成虫表膜蛋白进行组织定位。利用双抗体夹心ELISA方法检测感染E g的犬粪抗原。ELISA结果表明E g成虫表膜抗原具有良好的抗原性并能产生高效价抗体,抗体不与多头绦虫和泡状带绦虫抗原反应;Western blotting结果表明E g成虫表膜抗原与原头蚴、不成熟E g有共同蛋白成分。免疫组化结果证实虫体表膜蛋白分布在虫体表皮。该抗原抗体系统能检测到感染后13d的犬细粒棘球绦虫。结果表明该E g成虫表膜抗原抗体系统可用于诊断犬细粒棘球绦虫感染。
关键词： 细粒棘球绦虫成虫表膜抗原抗体 双抗体夹心ELISA 粪抗原
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