科研产出
细粒棘球绦虫Hsp70基因的克隆、表达及抗体制备
《中国畜牧兽医文摘 》 2013
摘要：[目的]克隆细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus,E.g)热休克蛋白家族基因Hsp70,在原核细胞中表达、纯化Hsp70蛋白并制备其特异性抗体.[方法]从包囊中分离原头蚴,提取RNA,RT-PCR扩增EgHsp70基因的cDNA,将其构建至原核表达载体pMAL-p2x,转化大肠杆菌BL-21菌株.通过改变诱导温度、IPTG浓度和诱导时间筛选出EgHsp70融合蛋白可溶性表达的最佳条件.并用麦芽糖亲和层析法纯化该蛋白.
关键词： Hsp70基因 细粒棘球绦虫 抗体制备 克隆 热休克蛋白 原核表达载体 IPTG浓度 特异性抗体
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胎次、日粮及环境温湿指数对奶牛HSP70表达的影响
《中国奶牛 》 2010
摘要：本文主要研究初产和经产、不同比例的过瘤胃淀粉和脂肪日粮及环境温湿指数对热应激奶牛HSP70表达的影响。试验选用54头中国荷斯坦奶牛,根据产奶量、泌乳天数和胎次相近原则,进行随机区组试验设计。试验奶牛分3个处理组(高过瘤胃淀粉低饱和脂肪酸组PF161、中等过瘤胃淀粉中等饱和脂肪酸组PF131和低过瘤胃淀粉高饱和脂肪酸组PF101),每个处理组18头奶牛。分别于正试期的第1天、第21天、第49天、第77天和试验结束时采集血样,应用酶联免疫吸附试验法检测HSP70的含量。结果显示:在正试期间,牛舍环境温湿指数均值为79.67,奶牛处于中度热应激;初产奶牛血液中HSP70的含量高于经产奶牛;中等过瘤胃淀粉中等饱和脂肪酸组的HSP70含量高于其他两组;HSP70含量随THI变化呈现升高-降低-升高-降低的变化趋势。
关键词： 热应激 HSP70 奶牛 酶联免疫吸附试验(ELISA)
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HSP70C融合草原兔尾鼠卵透明带3对小鼠抗生育的研究
《细胞与分子免疫学杂志 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：目的:探讨分枝杆菌热休克蛋白(HSP70)对草原兔尾鼠卵透明带3(LZP3)免疫不育效果的增强作用。方法:将HSP70全长和C端分别与LZP3融合构建pcD-L-HSP70和pcD-L-HSP70C重组质粒,同时与具有免疫不育功能的pcD-L和pcD-ACLC一起分别免疫NIH小鼠,分别检测重组质粒在机体真核细胞中的表达情况、T细胞增殖及体液免疫水平、抗生育效果、卵巢的病理变化和免疫荧光定位。结果:LZP3构建的重组质粒均能在小鼠肝脏中表达;免疫后能刺激机体T细胞增殖,尤其是pcD-ACLC和pcD-L-HSP70C免疫组(P<0·01);同时激发机体产生特异性抗体(P<0·05);除pcD-L-HSP70免疫组外其他3种重组质粒均具有抗生育效果(P<0·05),且pcD-ACLC和pcD-L-HSP70C极明显地降低了小鼠平均窝仔数(P<0·01)且未引发机体产生卵巢炎;直接免疫荧光结果表明在绿色激发光下小鼠卵母细胞的卵透明带均能发出绿色荧光。结论:与pcD-L-HSP70免疫相比,pcD-L-HSP70C能明显地降低小鼠平均窝仔数,这表明分枝杆菌热休克蛋白HSP70C端对增强LZP3免疫不育效果具有明显的基因佐剂功效。
关键词： 草原兔尾鼠卵透明带3 免疫不育 HSP70 融合佐剂
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