科研产出
几种抗氧化剂对马精液冷冻保存效果的影响
《黑龙江动物繁殖 》 2024
摘要：马精液的冷冻保存效果与其他家畜相差很大，这主要是由于马精液对冷冻过程更敏感，表现出更高的氧化应激与质膜损伤率，因此，需要找出更有效的方法来提高马精液冷冻保存效果。试验选取抗氧化剂谷胱甘肽（Gsh）、牛磺酸（Tau）、维生素C、蛋氨酸（Met）和原花青素（OPC）,加入精液稀释液中，用精子分析仪测定冻融后马精液的总体活力（TM）、前进式活力（PM）、快速运动精子比例（RAP）、平均路径速度（VAP）和直线性（LIN）,以评估不同抗氧化剂对马精液冷冻效果的影响；进一步试验选取牛磺酸为基础抗氧化剂，组合添加其他抗氧化剂后，评测抗氧化剂组合对马精子冻融后保存效果的影响；然后，选择在精液离心前、冷冻前和冷冻解冻后添加抗氧化剂，评估不同的抗氧化剂添加程序对马精液冷冻效果的影响。结果表明：单独添加牛磺酸、维生素C、蛋氨酸、原花青素等抗氧化剂的试验组2,3,4,5马精子活力参数均有提高；不同抗氧化剂组合试验中，添加谷胱甘肽与蛋氨酸的试验组9的抗氧化效果最好，马精子活力参数指标均高于对照组，而添加牛磺酸、谷胱甘肽、蛋氨酸的试验组8的抗氧化指标多数偏低；不同时间添加抗氧化剂牛磺酸，离心前添加的试验组10的马精子活力参数最高，冷冻前添加的试验组11次之，二者均显著高于冷冻前后二次添加的试验组12（P＜0.05）。说明在精液稀释液中添加牛磺酸、维生素C、蛋氨酸、原花青素等抗氧化剂是有益的，但牛磺酸与其他抗氧化剂配合没有达到很好的抗氧化效果；抗氧化剂适宜在离心前或冷冻前添加，而冷冻前后二次添加抗氧化剂可能对精子有伤害。
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五种糖对马精子低温保存及冷冻效果的影响
《黑龙江畜牧兽医 》 2018 北大核心
摘要：为了研究单独或组合添加葡萄糖、果糖、乳糖、棉籽糖及海藻糖对马精子低温和冷冻保存效果的影响,试验选取4匹6~12岁公马进行精液收集,经离心浓缩处理后置于含有不同糖的低温或冷冻稀释液中保存,低温保存1,24,48,72,96小时时检测活精子比例(total motility,TM)和直线运动精子比例(progressive motility,PM),评价糖对精子低温保存效果的影响,冷冻后精液于37℃水浴解冻后检测TM、PM、质膜完整率及高线粒体膜电势评价不同糖对精子冷冻效果的影响。结果表明:单独添加乳糖和棉籽糖组低温保存24 h后精液TM和PM明显低于葡萄糖、果糖及海藻糖组,葡萄糖、乳糖分别与其他几种糖两两组合低温保存1,24,48,72,96小时时精液TM和PM差异不显著,单独添加棉籽糖组精子冻融后TM和PM显著低于果糖和海藻糖组(P<0.05),但精子质膜完整率和高线粒体膜电势显著高于其他各组(P<0.05),单独添加葡萄糖、果糖、海藻糖及乳糖组精子冻融后TM、PM及高线粒体膜电势均无显著差异(P>0.05),添加果糖组冻融后精子质膜完整性显著低于葡萄糖组(P<0.05)。不同糖组合精子冻融后,乳糖+葡萄糖+海藻糖组精子质膜完整率显著高于乳糖+果糖组、乳糖+海藻糖组、乳糖+葡萄糖+果糖组、乳糖+果糖+海藻糖组(P<0.05),乳糖+葡萄糖+果糖组精子高线粒体膜电势显著高于乳糖+果糖组(P<0.05),与其他组相比差异不显著(P>0.05)。仅含棉籽糖、乳糖或棉籽糖+乳糖的稀释液不适合于马精液低温保存,不同糖组合并没有获得比经典葡萄糖+乳糖更好的低温和冷冻保存效果。
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抗氧化剂对马精子低温及冷冻保存效果的影响
《中国畜牧兽医 》 2017 北大核心
摘要：试验旨在研究不同抗氧化剂对马精子低温保存及冷冻效果的影响。选取6匹英纯血种公马作为试验动物,以INRA82液作为基础稀释液(对照组),分别添加谷氨酰胺(0.015g/mL)、甘氨酸(0.019g/mL)、半胱氨酸(0.024g/mL)、甲硫氨酸(0.015g/mL)、牛磺酸(0.063g/mL)、维生素C(0.4mg/mL)、维生素E(0.5mg/mL)、褪黑素(0.001mg/mL)制备成含有不同抗氧化剂的低温保存和冷冻保存稀释液,将浓缩处理后的马精子分别置于上述稀释液中保存或冷冻,检测低温保存48h后精子运动参数,评价抗氧化剂对精子低温保存的影响;检测精子冻融后运动参数、精子质膜完整性、线粒体膜电势及顶体完整性,评价抗氧化剂对精子冷冻效果的影响。结果表明,精子低温保存48h后,添加牛磺酸组活精子比例和前向运动精子比例显著高于对照组(P<0.05),添加维生素C组前向运动精子比例显著高于对照组(P<0.05)。冷冻解冻后结果表明,添加不同抗氧化剂没有改善精子冻融后活精子比例和前向运动精子比例,但添加甲硫氨酸显著延长了精子体外存活能力(P<0.05);添加不同抗氧化剂精子质膜完整性与对照组间无显著差异(P>0.05),但甲硫氨酸和甘氨酸组有高于对照组的趋势;添加维生素E和甲硫氨酸组精子线粒体膜电势显著高于对照组(P<0.05),不同抗氧化剂组精子顶体完整性与对照组间均无显著差异(P>0.05)。结果提示,低温保存时添加牛磺酸和维生素C可以提高精液低温保存效果;冷冻时添加甲硫氨酸能提高精子质膜完整性和线粒体膜电势,且能够延长精子冻融后的存活时间。
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精清浓度对马精子低温及冷冻保存效果的影响
《中国畜牧杂志 》 2016 北大核心
摘要：本研究旨在比较不同精清浓度对马精子低温保存效果的影响。选取4匹4~12岁英纯血种公马,收集精液用含有不同浓度精清的稀释液进行精液低温保存或冷冻,检测保存和解冻后精液质量,评价精清浓度对马精子低温和冷冻保存效果的影响。结果表明:30%和40%浓度精清组低温保存后精液TM、PM、RAP及VAP值均显著低于0%、10%和20%精清浓度组(P<0.05),10%精清浓度组低温保存24 h后TM值显著高于0%和20%精清浓度组,但保存至96 h后精液TM显著低于0%精清浓度组。不同浓度精清对精液冷冻效果的研究结果表明,含0%浓度精清组冻融后精液质量最优,随着精清浓度的增加冻融后活力及质膜完整性逐级递减。综上数据认为,进行马精液低温或冷冻保存时不添加精清可获得最理想的保存结果。
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pH对马精子低温保存效果的影响
《家畜生态学报 》 2016 北大核心
摘要：为了研究适宜马精液体外保存pH,本研究选取4匹4~12岁英纯血种公马,收集精液置于pH为6.5、6.7、6.9、7.1、7.3和7.5的INRA82和INRA96稀释液中,低温保存1、24、48和72h后,利用计算机辅助精子分析仪检测评价精子质量。结果表明:INRA96基础稀释液pH为7.1和7.3组保存48h后活精子比例(Total Mobility,TM)分别为81.33%±1.15和80.33%±4.04,显著高于pH为6.5和7.5组的72.67%±3.81和73.00%±4.58(P<0.05),与其他各组间无显著差异(P>0.05);INRA82基础稀释液pH为6.9组保存48h后活精子比例(Total Mobility,TM)为74.75%±3.51,显著高于pH为6.5和7.5组的67.75%±3.14和52.50%±1.53(P<0.05),与其他各组间无显著差异(P>0.05)。结果提示,马精子体外保存的适宜pH区间为6.9~7.3之间,当pH低于6.7或高于7.3时,随着保存时间的延长精子活力会明显下降。
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不同条件下转化BHK-21细胞冻存复苏效果比较
《现代农业科技 》 2010
摘要：为寻找出一种简单有效的转化BHK-21细胞冻存方法,对转化BHK-21细胞用2种冻存液和3种方法进行冻存,复苏后用台盼蓝拒染和生长曲线法检测细胞成活率。结果表明,采用2种冻存液,细胞复苏成活率无明显的差别,方法1为90%以上,方法2和3均为90%以下。方法1可用于转化BHK-21细胞冻存。
关键词： 转化BHK-21细胞 冻存 复苏 细胞成活率
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