科研产出
斜带石斑鱼mstn对其肌肉细胞增殖分化及相关基因表达的影响
《中山大学学报(自然科学版)(中英文) 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：斜带石斑鱼Epinephelus coioides是具有较高经济价值的海水鱼,如何促进石斑鱼生产性状改良一直是科学研究的重点之一.肌肉生长抑制素(mstn,myostatin)是调节肌肉生长的重要转化因子.本研究中,Mstn的亚细胞定位表明Mstn在斜带石斑鱼细胞质中呈点状分布.利用酶标仪测定被Mstn重组蛋白刺激肌肉原代细胞1~5 d后的A值,发现实验组细胞生长明显减缓,随着处理时间的增加,细胞活性差异进一步扩大.利用流式细胞仪测定被Mstn重组蛋白刺激的肌肉原代细胞细胞周期,发现实验组细胞周期受阻.用Mstn重组蛋白对肌肉原代细胞进行刺激,通过RT-qPCR检测Mstn重组蛋白对mstn信号通路及下游相关基因的影响,结果表明随着处理浓度的升高,p21、smad3和mrf4 mRNA的表达量也逐渐而上升,其中,smad3和mrf4表达量的上升不存在显著性差异;当处理浓度为100和1000 nmol/L时,p21存在显著性差异;随着处理浓度的升高,myod和myog mRNA的表达量均下降,但myod mRNA下降趋势不显著,myog mRNA显著下降,当处理浓度为100和1000 nmol/L时存在显著性差异.本研究揭示了Mstn定位于斜带石斑鱼GS细胞质;Mstn重组蛋白上调smad3、mrf4的表达,下调myod、myog的表达,来促进细胞的分化;同时Mstn重组蛋白能上调p21的表达,抑制细胞的增殖.本研究验证了Mstn在肌肉发育过程中的生物学功能,为后续深入开展mstn对鱼类肌肉发育的影响研究奠定了基础.
关键词： mstn 斜带石斑鱼Epinephelus coioides 肌肉 表达分析
全文链接
请求原文
绵羊MSTN基因启动子区SNPs分析
《华北农学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：采用测序和PCR-RFLP的方法,分析了MSTN基因启动子区在7个品种绵羊中的单核苷酸多态性,结果表明:存在2个SNP位点(-959T/C,-784G/A),表现为6种基因型(TT、TC、CC、GG、GA、AA),在-959T/C位点中,国外肉用绵羊品种陶赛特、德国肉用美利奴及我区的巴士拜羊,TT为优势基因型,地方品种绵羊巴音布鲁克羊、多浪羊和阿勒泰羊在该位点中CC为优势基因型,经χ2检验,其群体的基因频率和基因型频率均处于Hardy-Weinberg平衡状态,群体遗传多态性分析表明,这6个绵羊品种中群体的多态信息含量(PIC)均处于0.25～0.50之间,为中度多态,特克赛尔羊在该位点未发生突变。在-784G/A位点中,除陶赛特与特克赛尔羊在该位点未发生突变,其他5个品种绵羊优势等位基因均为G等位基因。经χ2检验后,其群体的基因频率和基因型频率均处于Hardy-Weinberg平衡状态,群体遗传多态性分析表明,多浪羊、巴士拜羊和巴音布鲁克羊的群体多态信息含量(PIC)均处于0.25～0.50之间,为中度多态,而阿勒泰羊和德国肉用美利奴的群体多态信息含量(PIC)小于0.25,为低度多态。
全文链接
请求原文
绵羊MSTN基因慢病毒表达载体的构建及其对成肌细胞的分化作用
《西北农林科技大学学报(自然科学版) 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：【目的】构建新疆细毛羊MSTN基因慢病毒表达载体,研究其在细毛羊成肌细胞分化中的作用,并探讨其作用机制。【方法】采用RT-PCR技术,扩增MSTN编码区序列,克隆入plex-mcs慢病毒表达载体,构建plex-MSTN慢病毒表达载体,并进行酶切及测序鉴定。将plex-MSTN包装成plex-MSTN慢病毒。用酶消化法分离培养新疆细毛羊成肌细胞,慢病毒感染制备MSTN过表达成肌细胞系,通过马血清诱导分化,Western blotting检测分化细胞MSTN基因的表达,免疫荧光分析分化肌管的融合率及肌管直径,Realtime RT-PCR检测分化相关基因的表达。【结果】克隆的新疆细毛羊MSTN基因编码区全长序列(1 128bp)与NCBI上公布的序列99.9%同源,仅在外显子2上存在单碱基突变;Western blotting检测结果显示,MSTN过表达成肌细胞过表达MSTN蛋白;免疫荧光检测表明,MSTN过表达成肌细胞的肌管融合率与肌管直径分别为5.69%和12.35μm,显著低于非转化成肌细胞(10.21%和18.5μm)(P<0.05);Re-altime RT-PCR结果显示,MSTN过表达成肌细胞中的Myogenin、p21、MyoD基因表达显著下调,Smad3基因表达极显著上调(P<0.01)。【结论】成功构建了细毛羊MSTN基因慢病毒表达载体,MSTN基因对细毛羊成肌细胞的分化具有显著的抑制作用,确定了MSTN基因与Myogenin、p21、MyoD及Smad3基因在成肌细胞分化过程中的调控关系。
全文链接
请求原文
首页上一页1下一页尾页
