细粒棘球绦虫Hsp70基因的克隆、表达及抗体制备

赵莉; 陈皓斐; 张文宝; 马正海; 张壮志; 张旭; 古努尔·吐尔逊; 米晓云; 金映红; 薛晶; 石保新; 《中国农业科学 》 2012 北大核心 CSCD

摘要：【目的】克隆细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus,E.g)热休克蛋白家族基因Hsp70,在原核细胞中表达、纯化Hsp70蛋白并制备其特异性抗体。【方法】从包囊中分离原头蚴,提取RNA,RT-PCR扩增EgHsp70基因的cDNA,将其构建至原核表达载体pMAL-p2x,转化大肠杆菌BL-21菌株。通过改变诱导温度、IPTG浓度和诱导时间筛选出EgHsp70融合蛋白可溶性表达的最佳条件。并用麦芽糖亲和层析法纯化该蛋白。纯化蛋白经皮下多点注射免疫新西兰白兔制备抗血清,ELISA和Western blotting检测血清效价和特异性。【结果】RT-PCR扩增获得EgHsp70基因的cDNA,酶切和测序结果表明EgHsp70基因已克隆入pMAL-p2x。表达条件优化实验结果筛选出Hsp70融合蛋白可溶性表达的最佳条件为:当A600为0.6时,以0.3 mmol.L-1 IPTG于30℃条件下诱导表达4 h。SDS-PAGE显示Hsp70融合蛋白相对分子质量约为68.6kD,经麦芽糖亲和层析法纯化获得了Hsp70融合蛋白,其表达量为2.5 mg.L-1。Western blotting检测证明制备的抗血清与EgHsp70融合蛋白、原头蚴粗提抗原、E.granulosis虫体蛋白和E.granulosis虫体表面蛋白均能特异性结合,ELISA检测表明获得的抗血清效价达到1﹕256 000。【结论】在大肠杆菌中表达并纯化获得了EgHsp70融合蛋白,并制备了高效价的兔抗EgHsp70蛋白抗血清,为研制包虫病疫苗及相关诊断试剂奠定了基础。

关键词： 细粒棘球绦虫 热休克蛋白家族基因Hsp70 抗血清

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金黄色葡萄球菌IsdB基因缺失序列比较与宿主特异性分析

王登峰; 吴建勇; 李建军; 杨学云; 王治才; 《中国动物传染病学报 》 2012

摘要：对新疆地区分离的牛源金黄色葡萄球菌XJ43(CC97)、XJ108(CC398)和XJ69(CC479)的IsdB基因序列测定、比对发现,在编码非功能结构域的277-314碱基(5'-3')间存在不同序列的缺失,并导致各编码蛋白质的二级结构出现一定差异;Blast分析显示,NCBI中登录的金黄色葡萄球菌不同菌株IsdB基因序列相似性大于95%,但与新分离的三种序列型相比,除医源菌株USA300 TCH959(CC8)与XJ69(CC479)的IsdB基因序列缺失一致外,其他医源菌株与XJ43缺失的序列均不一致;牛源或羊源CC133、CC425、CC151和属人畜共患CC398 XJ108菌株IsdB基因缺失的序列一致,表明这种序列缺失与金黄色葡萄球菌的宿主特异性无绝对相关性,但含有IsdB基因序列缺失的菌株在反刍动物乳腺感染中出现频率较高。

关键词： 金黄色葡萄球菌 IsdB基因 宿主特异性

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新疆地方良种肉羊开发利用的思考

石刚; 侯广田; 王建勋; 王勇; 郭鹏; 《草食家畜 》 2012

摘要：根据对新疆肉羊养殖业现状的调研以及多年的研究,指出了新疆本地肉羊品种及产业化存在的突出问题,提出了在牧区局部保种多元选育、农区大力开展杂交改良的新疆地方良种肉羊开发利用的思路和建议。

关键词： 新疆 肉羊 开发利用

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新疆褐牛种群资源调查研究

张杨; 李红波; 张金山; 闫向民; 杜玮; 周振勇; 《中国牛业科学 》 2012

摘要：[目的]对新疆褐牛主产区的种群资源进行调查研究,掌握新疆褐牛资源现状与分布特点,为品种的选育提高、改良与合理开发利用提供基础资料。[方法]按照地、县、乡分划成调查小区,每个小区涵盖所有住户,做到不重不漏,然后再进行统计分析。[结果]目前纯种新疆褐牛为17.068万头,各类新疆褐牛改良牛存栏已达到150万余头,其中伊犁河谷存栏约90万头,塔城地区存栏约36万头,其它地区新疆褐牛存栏约20余万头。[结论]成年新疆褐牛母牛中优良个体较少,整体生产性能不高。建议在现有的生产方式下,因地制宜的开展新疆褐牛的选育提高与品种改良工作,同时提高生产管理与技术水平,挖掘和发挥当前种群的生产潜能。

关键词： 新疆褐牛 品种资源 调查研究

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现代化生鲜乳安监体系中的物联网应用

齐心; 杜大川; 陈新文; 温希军; 《新疆畜牧业 》 2012

摘要：2008年,食品安全问题引起了社会大众的广泛关注。为了切实保证食品安全,确保人民生命健康,各食品生产企业不断增加投入,从原料采集、储藏、运输到加工生产的每一个细节,都加强管理。国家更是紧锣密鼓,加快立法。2009年2月28日,《中华人民共和国食品安全法》由中华人民共和国第十一届全国人民代表大会常务委员会第七次会议审议通

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新疆畜牧企业网上展示平台的建立与应用

王琼; 陈新文; 温希军; 李天斗; 龙伊; 薛小波; 《农业网络信息 》 2012

摘要：利用互联网提升企业产品、技术等宣传效率是现代企业发展的需求。针对新疆畜牧企业宣传方式现状及问题,提出了网上展示平台的设计思路,并系统阐述了该平台的结构设计、功能及应用方法等。该平台的建立为新疆畜牧企业的发展起到积极的推进作用。

关键词： 畜牧企业 网上展示平台 建立

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番茄渣在畜禽饲料中应用研究现状

桑断疾; 刘艳丰; 王文奇; 唐淑珍; 侯广田; 周艳; 韩靖; 《草食家畜 》 2012

摘要：番茄中含有丰富的蛋白质,脂肪和其它营养成份,而且是一种很好的饲料资源,本文综述了番茄的营养价值及在动物饲料中的应用。

关键词： 番茄渣 饲料 研究

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绵羊的免疫程序

王光雷; 艾力西热·买买提; 刘志强; 努尔·库尔玛那里; 《草食家畜 》 2012

摘要：本文介绍了澳大利亚绵羊传染病预防免疫程序,供参考。

关键词： 绵羊 免疫程序

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新疆85县市牛羊肉生产的专业化程度分析

苏尤力; 杨奎花; 王惠; 刘娜娜; 许承云; 《草食家畜 》 2012

摘要：本文通过对新疆85个县市牛羊肉生产专业化程度的分析,为各县市合理安排牛羊肉专业化生产经营提供建议,以期促进该县市肉牛肉羊产业健康、持续发展。

关键词： 新疆地方86县市 牛羊肉 生产 专业化程度

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牛出血性肠炎A型产气荚膜梭菌的分离鉴定

孙连童; 吴建勇; 李建军; 杨魁; 段新华; 王治才; 《中国动物传染病学报 》 2012

摘要：从新疆维吾尔自治区某牛场采集的3份疑似出血性肠炎病料中分离到8株产气荚膜梭菌,用PCR扩增保守基因16SrRNA,并进行序列测定和同源性分析,再通过多重PCR方法扩增型特异性基因进行分离菌株的分型鉴定。结果显示,所分离的8株产气荚膜梭菌之间16S rRNA基因同源型为100%,与GenBank参比序列同源性在99.8%以上,确定为产气荚膜梭菌。遗传进化分析表明,本次分离的8株产气荚膜梭菌之间拥有共同起源,但与所用的参考菌株分属不同来源。多重PCR扩增结果显示,8株菌株均为产气荚膜梭菌A型。

关键词： 牛出血性肠炎 产气荚膜梭菌 分离鉴定

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