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口蹄疫O型病毒二温式RT-PCR检测方法的建立及初步应用

文献类型： 中文期刊

作者： 姚怀兵 1 ; 赵毅 2 ; 刘宏 2 ; 张毅 2 ; 任方 2 ; 黄炯 3 ;

作者机构： 1.新疆农业大学动物医学学院

2.天康生物股份有限公司

3.新疆畜牧科学院兽医研究所

关键词： 口蹄疫O型病毒;二温式RT-PCR;检测方法

期刊名称： 中国畜牧兽医

ISSN： 1671-7236

年卷期： 2017 年 44 卷 02 期

页码： 311-318

收录情况： 北大核心

摘要： 试验通过对口蹄疫病毒核苷酸序列的比对分析,在O型口蹄疫病毒的P1基因保守区,设计1对特异性引物,应用均匀设计法优化反应参数,建立口蹄疫O型病毒二温式RT-PCR检测方法。对该法进行特异性试验、敏感性试验检测。结果表明,该二温式RT-PCR方法只对口蹄疫O型病毒敏感,对其他血清型的口蹄疫病毒及常见的猪病病毒均不敏感;扩增条带与预期目的片段大小相符,扩增片段经克隆、测序发现与引物所在基因序列的同源性为100%;检测病毒RNA的敏感性为1.665pg/μL,其敏感性与三步法PCR敏感性检测结果没有差异。运用该法对54头攻毒试验的动物进行检测,阳性鉴定结果与三步法PCR鉴定结果一致,与三步法PCR相比该法节省了20min,表明所建立的口蹄疫O型病毒二温式RT-PCR方法是一种准确、快速、特异、敏感的检测方法。

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