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无血清无饲养层培养体系在绵羊胚胎干细胞分离中的应用

文献类型： 中文期刊

作者： 陈博 1 ; 赵云程 1 ; 林嘉鹏 1 ; 孙晓岩 2 ; 陈雪梅 2 ; 黄俊成 1 ;

作者机构： 1.新疆畜牧科学院农业部草食家畜繁育生物技术重点开放实验室

2.东莞石龙人民医院

关键词： 胚胎干细胞;囊胚;绵羊胚胎;N2B27

期刊名称： 现代生物医学进展

ISSN： 1673-6273

年卷期： 2014 年 14 卷 06 期

页码： 1012-1016

摘要： 目的:本文采用N2B27无血清无饲养层的完全已知成份的培养体系,通过机械分离法分离不同阶段的绵羊囊胚,观察不同阶段囊胚对分离绵羊类胚胎干细胞的影响。方法:本实验采用N2B27无血清无饲养层成份完全已知的培养体系,利用机械分离法对不同阶段的绵羊囊胚进行分离,观察其绵羊类胚胎干细胞的原代集落形成率,以及AKP染色,多潜能性候选基因Oct-4和Sox-2免疫荧光检测。结果:分离早期阶段绵羊囊胚获得的绵羊类胚胎干细胞的形成率显著低于扩张(孵化)阶段囊胚(19.6%(11/56)vs 36.9%(31/84))(P<0.05),同时早期和扩张(孵化)阶段绵羊囊胚的AKP染色和多潜能性候选基因Oct-4、Sox-2的表达呈阳性。结论:N2B27无血清无饲养层培养体系是一种有效分离绵羊类胚胎干细胞的培养基,同时分离绵羊扩张(孵化)阶段的囊胚可以显著的提高原代类胚胎干细胞的建系率,为提高绵羊类胚胎干细胞的建系奠定了基础。

  • 相关文献

[1]家畜胚胎干细胞多能性候选信号通路及分子标志. 赵云程,陈博,周川,张秀华,黄俊成. 2010

[2]多因素对昆明小鼠胚胎干细胞原代集落形成和后期增殖的影响. 陈博,赵云程,陈士斌,王静,金贤华. 2011

[3]无血清无饲养层培养体系在绵羊胚胎干细胞分离中的应用. 陈博,黄俊成. 2013

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