科研产出
新疆和田地区鹅细小病毒感染调查及VP1基因遗传进化分析
《黑龙江畜牧兽医 》 2024 北大核心
摘要：为了解新疆和田地区鹅细小病毒(Goose parvovirus, GPV)的感染情况及遗传进化特征，试验采集新疆和田地区和田县、于田县、皮山县鹅养殖场的578只死亡雏鹅的内脏(肝脏、脾脏)及肛拭子样本(和田县344只，于田县67只，皮山县167只),采用PCR方法对鹅细小病毒进行检测，并随机选取2份阳性病料样本对鹅细小病毒VP1基因进行PCR扩增、测序、BLAST比对和遗传进化分析。结果表明：共检测出44份鹅细小病毒阳性样品，总阳性率为7.61%(44/578),其中新疆和田地区和田县鹅细小病毒阳性率为12.50%(43/344),于田县鹅细小病毒阳性率为1.49%(1/67),皮山县未检测到鹅细小病毒。随机选取的2株鹅细小病毒(XJHT-1、XJHT-2株)均为经典鹅细小病毒，与鹅细小病毒各参考毒株VP1基因编码氨基酸序列相似性分别为89.5%～95.8%和92.1%～97.3%,与番鸭细小病毒参考毒株VP1基因编码氨基酸序列相似性分别为76.0%～85.4%和78.5%～88.7%。鹅细小病毒XJHT-1、XJHT-2株与鹅细小病毒DY16株(中国江苏)的相似性最高，分别为95.8%和97.3%,遗传距离最近；XJHT-1株与鹅细小病毒GD株(中国广东)和SD-F30株(中国河北)的相似性较低，分别为89.5%和89.6%;XJHT-2株与鹅细小病毒SHM319株(德国)、GD株(中国广东)和SD-30株(中国河北)的相似性较低，分别为92.1%、92.8%和92.8%。说明和田地区部分鹅场存在鹅细小病毒的感染，但阳性率较低，选取的2株毒株与鹅细小病毒DY16株(中国江苏)的氨基酸序列相似性最高，推测可能由鹅细小病毒DY16株进化而来。
关键词： 和田地区 鹅细小病毒 流行病学调查 VP1基因 遗传进化分析
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口蹄疫病毒VP1基因的原核可溶性表达
《中国畜牧兽医 》 2009 北大核心
摘要：针对重组原核表达载体表达目的蛋白以包涵体形式存在的问题,作者对影响外源蛋白表达的IPTG的浓度、温度、时间等因素均进行了探索,以观察VP1蛋白的可溶性情况。通过PCR技术将VP1基因克隆至pGEM-T载体中,然后将pET-28a(+)和pGEM-T载体分别进行双酶切,构建重组的pET-28a-VP1载体,将重组载体转化至BL21中,诱导后经SDS-PAGE检测可见约29 ku的目的蛋白条带。插入的外源目的蛋白主要以包涵体的形式存在,上清中的可溶性蛋白甚微。试验结果表明,这可能与蛋白本身的氨基酸组成有重要关联。
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口蹄疫病毒灭活疫苗中VP1基因RNA抽提方法的建立
《中国畜牧兽医 》 2009 北大核心
摘要：本试验提取疫苗种毒、BEI灭活病毒和白油乳化灭活疫苗病毒中的RNA,并就VP1基因进行了RT-PCR扩增、核酸序列测定和序列比对分析。结果显示,3种来源的VP1基因片段长度均为813 bp,与预期的目标相符,核苷酸序列显示3种方法处理的病毒VP1同源性为100%。说明灭活剂BEI和乳化工艺没有全部破坏口蹄疫病毒VP1基因核酸,为检测疫苗毒株的核酸序列建立了一种方法。
关键词： 口蹄疫病毒 灭活疫苗 二乙烯亚胺(BEI) VP1基因
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O型口蹄疫病毒VP1基因在2种原核表达载体上的表达
《中国畜牧兽医 》 2009 北大核心
摘要：设计1对引物将口蹄疫病毒(foot and mouth disease virus,FMDV)VP1基因克隆到T载体上,通过NdeI和XhoI双酶切VP1基因和pET-28(a),在T4连接酶的作用下构建重组表达载体pET-28a-VP1;然后用EcoR I和XhoI双酶切VP1基因与pET-41(a),在T4连接酶的作用下构建重组表达载体pET-41a-VP1;然后将这2个新构建的载体分别通过热冲击法转化BL21(DE3),37℃不同IPTG浓度和32℃、0.01 mmol/L IPTG诱导表达,SDS-PAGE结果显示pET-28a-VP1的表达量高于pET-41a-VP1,在DTT和乙醇的作用下,二者均没有可溶性蛋白出现。
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AsiaⅠ型口蹄疫病毒灭活疫苗毒株不同宿主系传代中VP1基因的遗传变异研究
《中国畜牧兽医 》 2008 北大核心
摘要：口蹄疫病毒结构蛋白VP1参与构成病毒粒子的主要中和抗原位点,是4种结构蛋白中最易发生变异的。在病毒传代过程中,对VP1基因进行遗传变异分析是口蹄疫疫苗研制中不可或缺的环节。为此,作者扩增了经不同宿主系(乳鼠、BHK21细胞)连传不同代次的AsiaⅠ型毒株的VP1基因,并对其进行遗传变异分析,毒株间核苷酸同源性为99.4%~99.8%,推导氨基酸序列同源性为98.6%~100%;制苗毒株经过不同宿主系有限传代后,与传代前的原毒(MF1)相比,VP1基因未发生大的变异,主要抗原位点较稳定,说明以此种方式获得的制苗毒株制备的灭活疫苗是稳定的,适用于该毒株流行区域内相关家畜的免疫预防。
关键词： FMDV AsiaI型 灭活疫苗毒株 VP1基因 遗传变异分析
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口蹄疫病毒VP1基因研究进展
《动物医学进展 》 2008 北大核心
摘要：口蹄疫病毒VP1基因是参与构成病毒粒子的主要中和抗原基因,其表达蛋白可以诱导动物机体产生中和抗体。对VP1基因进行分析,不仅对口蹄疫病毒遗传变异的研究具有指导作用,而且对口蹄疫的流行病学调查、疫源追踪、毒株型和亚型的分析,甚至对新型疫苗的研制也具有重要意义。因此,VP1基因一直是口蹄疫病毒分子生物学研究领域中的热点。文章就口蹄疫病毒VP1基因的特性及其在基因分型、诊断和疫苗研究中的应用进行了综述。
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