科研产出
影响绵羊腹腔镜采卵效果因素的研究
《中国畜牧杂志 》 2025 北大核心
摘要：为提升绵羊腹腔镜采卵的效果，本研究对133只德国美利奴羊和45只中国美利奴羊供体进行激素诱导，利用腹腔镜采集供体母羊卵泡中的卵丘-卵母细胞复合体，统计卵母细胞回收率等数据。从促卵泡素（FSH）不同处理方案（420 IU/480 IU，等量/递减）、不同FSH（宁波三生和广州威生）、不同操作人员及不同品种等角度进行统计和分析。结果显示：(1)在中美羊和德美羊中，480 IU递减组的回收效果显著高于其余组；(2)不同操作人员采集的卵母细胞数量差异极显著；(3)不同类型FSH（广州威生长效FSH/宁波三生FSH）对回收卵母细胞的数量没有显著差异，但在卵母细胞退化率方面差异极显著（33.78%vs 0.60%）；(4) 2个绵羊品种卵母细胞回收率无显著差异。
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影响绵羊卵母细胞回收效率因素的研究
《中国畜禽种业 》 2024
摘要：为优化卵母细胞采集方法、提高绵羊卵巢资源利用率奠定基础，该试验利用屠宰绵羊卵巢，研究采卵人员及采卵工具（注射器、负压泵）对卵母细胞回收效率的影响。结果表明：不同人员对卵母细胞回收数量和质量均存在极显著差异（P＜0.01）；哈萨克羊/阿勒泰羊卵母细胞回收数量和质量显著低于湖羊（P＜0.05）；不同规格注射器针头，对绵羊卵母细胞回收数量和质量存在极显著差异（P＜0.01），且9号针头（兽用）采卵效果较优；真空负压泵对卵母细胞的回收效果显著高于注射器（P＜0.05）。可见，注射器采集卵母细胞对技术人员的熟练程度要求较高，采用真空负压泵采卵方法卵母细胞回收效率显著高于注射器采卵方法。
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绵羊基质Gla蛋白基因克隆、表达谱及其在卵巢组织的定位
《江苏农业学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：本研究旨在克隆绵羊基质Gla蛋白(MGP)基因的蛋白质编码序列(CDS),制备特异抗体，并检测该基因在绵羊卵巢组织中的表达分布。以卵泡总cDNA为模板，扩增获得绵羊MGP基因CDS区全长序列；合成绵羊MGP蛋白C末端15个氨基酸长度的多肽，免疫小鼠，制备抗血清；利用实时荧光定量PCR(qPCR)和免疫印迹技术分析其在不同组织和不同大小的卵泡中的表达水平；通过免疫组织化学方法分析其在卵巢组织中的表达分布特征。结果表明，成功获得绵羊MGP基因的CDS区全长片段(467 bp),编码103个氨基酸，理论相对分子量为12 230.96,等电点为9.27;N末端19个氨基酸序列被预测为信号肽序列，成熟肽有84个氨基酸，为外泌性蛋白质，无胞内区；MGP总蛋白质氨基酸序列与山羊、牛的同源蛋白质相似性分别为100.0%、99.0%,与人、小鼠的相似性均为85.4%。MGP mRNA和蛋白质在绵羊心、肝、脾、肺、肾等组织中的相对表达量较低，在卵巢、输卵管、子宫等生殖系统或组织中的相对表达量较高，在黄体中的相对表达量也较高；MGP在卵巢组织颗粒细胞、卵丘细胞中均有表达，但在闭锁卵泡中不表达。本研究结果可为进一步研究MGP在卵巢组织中的生物学功能提供参考。
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色瓦绵羊RPL8基因的组织表达特征及生物信息学分析
《南方农业学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：【目的】研究色瓦绵羊核糖体蛋白L8基因（RPL8）在各组织部位的表达特征及其潜在功能作用，揭示RPL8基因调控色瓦绵羊产奶质量的分子作用机制，为推进色瓦绵羊的分子遗传育种提供理论依据。【方法】PCR扩增色瓦绵羊RPL8基因，通过ProtParam、ProtScale、SignalP 5.0、TMHMM 2.0等在线软件分析RPL8基因结构特征及潜在功能，并以实时荧光定量PCR检测其在色瓦绵羊各组织中的表达分布情况。【结果】RPL8基因在色瓦绵羊乳腺、肌肉、心脏、肾脏、脾脏、肝脏、小肠、瘤胃和卵巢等9个组织中均有表达，在小肠、乳腺和卵巢中的相对表达量极显著高于其他组织中的相对表达量（P＜0.01）。色瓦绵羊RPL8基因编码区（CDS）序列长774 bp，共编码257个氨基酸残基；基于RPL8基因核苷酸序列相似性构建的系统发育进化树显示，色瓦绵羊与山羊、牦牛、牛等反刍物种的亲缘关系较近。色瓦绵羊RPL8蛋白相对分子量为28024.66Da，理论等电点（pI）为11.04，是一种稳定的碱性亲水性蛋白，不具有跨膜结构，主要定位于细胞质（占78.3%）；色瓦绵羊RPL8蛋白存在15个磷酸化位点[7个丝氨酸（S）位点，8个苏氨酸（T）位点]，其二、三级结构中均以无规则卷曲为主。色瓦绵羊RPL8蛋白的互作蛋白均为核糖体蛋白，其同源性高达99.90%，其中，RPS5、RPS16、RPL11、RPS3、RPS18和RPS11属于通用核糖体蛋白家族，RPL13属于真核核糖体蛋白家族。【结论】色瓦绵羊RPL8是一种胞内稳定的碱性亲水性蛋白，具有核糖体蛋白的基本结构特征。RPL8基因在色瓦绵羊各组织中的表达具有普遍性，尤其在乳腺和卵巢中呈高表达，说明RPL8基因除了发挥其家族基本功能作用外，在色瓦绵羊乳腺和卵巢组织中可能还影响乳脂含量与卵泡的周期性发育。
关键词： 色瓦绵羊 核糖体蛋白 RPL8基因 乳腺 卵巢 组织表达特征
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利用Solexa测序技术鉴定策勒黑羊microRNA
《中国畜牧兽医 》 2016 北大核心
摘要：试验旨在挖掘、分析策勒黑羊卵巢组织microRNA(miRNA),为进一步研究特定miRNA参与策勒黑羊卵泡发育及激素分泌等相关生殖活动的机制奠定理论基础。从策勒黑羊卵巢组织中提取总RNA,分离、构建小片段RNA文库,进行Solexa测序和生物信息学分析。结果表明,共获得9 527 311条干净序列读数,小RNA序列长度主要分布在21~23nt;共鉴定出434个策勒黑羊卵巢组织表达的保守miRNA,其中表达量在100以上有167个;鉴定出57个候选miRNA,其中表达量在100以上有8个。测序成功获取了策勒黑羊卵巢组织miRNA序列及表达谱,卵巢组织miRNA表达丰富且表达量各异。
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萨福克羔羊卵泡诱导发育效果的研究
《中国农业大学学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：为稳定并提高萨福克羔羊卵泡发育效率,通过肌肉注射FSH和PMSG的方法,对可能影响萨福克羔羊激素诱导效果如羔羊日龄、体重、健康状况和季节等因素进行研究。结果显示:1)5~6周龄萨福克羔羊经激素处理后的平均卵泡数(114.18vs 22.17)、回收的卵母细胞数(82.54vs 12.83)以及可用卵母细胞数(72.79vs 10.83)极显著高于8~9周龄组(P<0.01);2)体重在8~18kg之间的5~6周龄羔羊,不影响处理效果(P>0.05);3)有疾病史的羔羊处理效果显著低于健康羔羊组(P<0.01);4)春、秋季节对羔羊卵泡发育及回收的卵母细胞数没有影响(P>0.05),但春季羔羊卵母细胞体外受精卵裂率(54.31%vs 73.93%)和囊胚率(21.34%vs 35.73%)显著低于秋季(P<0.05);5)秋季羔羊胚胎移植受胎率(51.33%vs 26.07%)显著高于春季(P<0.05);6)移植早期胚胎或囊胚期胚胎对受胎率没有影响(P>0.05)。选择5~6周龄、体重在8~18kg之间、无疾病史的萨福克羔羊,能显著提高卵泡发育效率;秋季羔羊卵母细胞发育能力显著高于春季;相同季节内,移植早期胚胎或囊胚期胚胎受胎率间没有差异。
关键词： 外源激素 萨福克羔羊 卵母细胞 体外受精 胚胎移植
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绵羊卵丘细胞直径与卵母细胞质量的相关性
《江苏农业科学 》 2014 北大核心
摘要：利用RT-PCR方法,检测不同直径绵羊卵泡卵丘细胞中FSHR、EGFR、GHR、b FGF、CYP19A、AMH基因的mRNA表达规律及卵母细胞孤雌激活后胚胎发育的影响,结果表明,大、中、小卵泡卵丘细胞中都有FSHR、EGFR、GHR、b FGF、CYP19A、AMH的mRNA表达,不同直径卵泡卵丘细胞呈现递增趋势,大卵泡卵丘细胞与中小卵泡的卵丘细胞相对表达量差异显著(P<0.05);AMH在直径>5.0 mm的卵泡卵丘细胞中有所下降。不同大小卵泡卵母细胞经体外培养,结果表明,各卵泡卵母细胞直径组间成熟率不显著,随卵泡直径的增大卵裂率增加,1.0~2.0 mm组与2.1~5.0 mm组卵裂率都显著低于>5 mm组(P<0.05),相互间无差异(P>0.05);囊胚率也呈现逐渐增加的趋势,卵泡大于5.0 mm卵母细胞组极显著高于1.0~2.0 mm组(P<0.01),2.1~5.0 mm组(P<0.05)。证实卵丘细胞在绵羊卵母细胞成熟和受精及随后的胚胎发育过程中起重要作用,卵泡直径对卵母细胞发育能力产生影响。
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Gdf9、Zar1、Mater、Dnmt1 mRNA在绵羊卵母细胞复合体、裸卵及卵丘细胞中的表达
《江苏农业科学 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：为了探讨卵丘细胞的完整性在支持和促进绵羊卵母细胞成熟过程中发挥的重要作用以及卵丘与卵母细胞互作的分子机理。本研究对具有完整致密卵丘细胞包裹的和无卵丘细胞包裹的绵羊卵母细胞进行了体外成熟培养试验,以不同方式处理卵丘细胞,应用Rael-time PCR技术,检测母源基因Gdf9(生长分化因子9),Zar1(合子阻滞因子1),Mater(胚胎必要的母体抗原),Dnmt1(DNA甲基化酶1)在不同卵母细胞和卵丘细胞中mRNA的含量。结果表明,4个基因的mRNA在GV期的表达量均高于24 h成熟培养的卵母细胞(P<0.05),除Dnmt1外其他3个基因在致密卵丘细胞包裹的卵母细胞的表达量均高于自然裸卵(DOs)(P<0.05),Zar1和Mater在24 h卵丘-卵母细胞复合体的表达量低于24 h裸卵(P<0.05),除Dnmt1外其他3个基因在24 h共成熟卵丘细胞中表达量均高于未培养的卵丘细胞(P<0.05)。结果提示,这4个母源基因对卵母细胞成熟有重要影响,且可能参与了卵丘细胞与卵母细胞间的相互作用,本研究结果为提高卵母细胞的体外成熟效率提供了依据及理论基础。
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细毛羊羔羊超数排卵及体外胚胎生产移植
《新疆农业科学 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：【目的】研究羔羊日龄、羔羊体重、超排方法、精卵共孵育时间对细毛羔羊超排效果及卵母细胞体外受精效果的影响。【方法】用国产FSH对4～9周龄羔羊进行两种超排方法处理,回收可用卵母细胞1 032枚,体外受精后移植受体98只,产羔25只。【结果】不同周龄羔羊只均获卵数和可用卵数之间差异显著(P<0.05);不同激素方案处理组的发育卵泡两种处理方案在发育卵泡数上无显著差异(P>0.05),但在回收率和可用卵数上差异显著(P<0.05);不同体重组只均发育卵泡数和可用卵数之间差异显著(P<0.05)。【结论】4～6周龄的细毛羊羔羊超排获得卵母细胞数目较多;重复超排的羔羊超排效果不理想;同时,将受精液pH值调为7.5～7.6,并将精卵共孵育时间控制在22～26 h,卵母细胞体外受精及发育效果较好。
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双峰驼卵巢的形态观察
《黑龙江动物繁殖 》 2011
摘要：在冬春季节里,通过对87个双峰驼卵巢进行观察测量,研究其形态及卵泡、黄体数量分布情况。空怀的双峰驼的卵巢上可看到许多大小不同的卵泡、红体、黄体。在整个发情期都有较多的卵泡分布,其卵泡和黄体明显突出,形状一般为球形或者半球形,边界清晰,与其它哺乳动物明显不同。单个卵巢卵泡数最多可达69个,直径最大可达3.31 cm,黄体数最多可达7个,可存在不同阶段的退化黄体多达6个,黄体直径最大可达2.84 cm,其体积占到整个卵巢的3/4。大卵泡在左卵巢居多,可达70%,左侧卵巢上大卵泡数量、中卵泡数量、功能性黄体数量均多于右侧,说明左侧排卵的几率大于右侧。小卵泡数占卵泡总数的绝大部分,高达88.14%。随着卵巢上大卵泡数量的增加,大卵泡的直径、中小卵泡数量有减少的趋势,呈负相关,但差异不显著。随着卵巢上大卵泡直径的增加,大卵泡数量、中卵泡数量也有减小的趋势,说明优势卵泡对中小卵泡的生长有抑制作用。功能性黄体的数量、直径和大卵泡的数量、直径呈负相关,差异显著。双峰驼大部分卵泡在发育过程中退化萎缩,只有1～2个卵泡能成熟排卵。
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