科研产出
无血清无饲养层培养体系在绵羊胚胎干细胞分离中的应用
《现代生物医学进展 》 2014
摘要:目的:本文采用N2B27无血清无饲养层的完全已知成份的培养体系,通过机械分离法分离不同阶段的绵羊囊胚,观察不同阶段囊胚对分离绵羊类胚胎干细胞的影响。方法:本实验采用N2B27无血清无饲养层成份完全已知的培养体系,利用机械分离法对不同阶段的绵羊囊胚进行分离,观察其绵羊类胚胎干细胞的原代集落形成率,以及AKP染色,多潜能性候选基因Oct-4和Sox-2免疫荧光检测。结果:分离早期阶段绵羊囊胚获得的绵羊类胚胎干细胞的形成率显著低于扩张(孵化)阶段囊胚(19.6%(11/56)vs 36.9%(31/84))(P<0.05),同时早期和扩张(孵化)阶段绵羊囊胚的AKP染色和多潜能性候选基因Oct-4、Sox-2的表达呈阳性。结论:N2B27无血清无饲养层培养体系是一种有效分离绵羊类胚胎干细胞的培养基,同时分离绵羊扩张(孵化)阶段的囊胚可以显著的提高原代类胚胎干细胞的建系率,为提高绵羊类胚胎干细胞的建系奠定了基础。
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口蹄疫病毒表位嵌合蛋白在枯草芽胞杆菌中的分泌表达
《中国兽医科学 》 2014 北大核心 CSCD
摘要:为了将口蹄疫病毒(FMDV)中和表位展示在病毒样颗粒(VLP)表面,以猪圆环病毒2型(PCV2)衣壳蛋白为骨架,用FMDV O/Mya-98/2010毒株G-H环替换PCV2自身中和表位,构建嵌合衣壳蛋白CaO。为分泌表达CaO蛋白,在芽胞杆菌穿梭质粒pHCMC05的多克隆位点中顺次插入枯草芽胞杆菌P43启动子和中性蛋白酶B分泌信号肽(nprBsp),构建分泌型大肠杆菌-枯草芽胞杆菌穿梭质粒p7257-P43。然后将合成的CaO基因插入p7257-P43质粒nprBsp的下游,构建分泌表达质粒p7257-P43-CaO。将该质粒转化枯草芽胞杆菌WB800,氯霉素诱导表达。上清经SDS-PAGE检测,嵌合蛋白CaO在枯草芽胞杆菌中得到表达。Western-blot证实,该蛋白具有反应原性。免疫电镜可观察到直径约15nm±2nm的VLP,表明嵌合蛋白在体外能有效组装。
关键词: 口蹄疫病毒 表位嵌合蛋白 猪圆环病毒2型 枯草芽胞杆菌
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改良格拉纳达培养基分离奶牛乳房炎奶样中无乳链球菌的效果评价
《新疆农业科学 》 2014 北大核心 CSCD
摘要:【目的】探索一种适合奶牛乳房炎奶样中无乳链球菌高效分离、鉴定的培养基,对格拉纳达培养基(Granada medium)进行改良,用其分离奶牛乳房炎奶样中无乳链球菌,并进行效果评价。【方法】改良格拉纳达培养基(Modified Granada medium,MGM)的成分为示蛋白胨、玉米淀粉、葡萄糖、丙酮酸钠、盐酸半胱氨酸、硫酸镁、对氧氮己环丙磺酸(MOPS)、磷酸氢二钠、甲氨蝶呤钠、结晶紫和琼脂粉。用MGM、改良爱德华培养基(Modified Edwards Medium,MEM)和血琼脂(Blood Agar,BA)三种培养基对187份奶牛隐性乳房炎奶样进行无乳链球菌分菌培养,采用PCR方法鉴定分离菌株,从而评价三种培养基在分离奶样中无乳链球菌的特异性和敏感性。【结果】在乳房炎无乳链球菌分离中,MGM、MEM和BA的特异性分别为100%、75.0%和18.2%,敏感性分别为88.0%、53.2%和29.1%。MGM作为选择、鉴定培养基,利用无乳链球菌产生红-橙色色素的特性,通过肉眼观察菌落颜色,一步程序就可以鉴定出无乳链球菌。【结论】该方法为奶牛乳房炎奶样中无乳链球菌的分离提供了一种快捷、简便的新方法。
关键词: 改良格拉纳达培养基 奶牛乳房炎 无乳链球菌 B群链球菌 分离鉴定
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番茄渣对绵羊生长性能和瘤胃发酵参数的影响
《动物营养学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要:为了研究番茄渣对绵羊生长性能和瘤胃发酵参数的影响,选择体重40 kg左右的萨福克×阿勒泰杂交母羊40只,随机分为4组,每组10只,对照组、低水平番茄渣组、中等水平番茄渣组和高水平番茄渣组分别饲喂含0、30%、40%和50%番茄渣的全混合日粮。预试期9 d,正试期44 d。结果表明:1)与对照组相比,饲喂中等、低水平番茄渣不影响绵羊平均日增重(P>0.05),饲喂高水平番茄渣显著降低了绵羊平均日增重(P<0.05);饲喂低水平番茄渣显著提高了绵羊干物质采食量(DMI)(P<0.05),饲喂中等水平番茄渣极显著提高了绵羊DMI(P<0.01),饲喂高水平番茄渣极显著降低了绵羊DMI(P<0.01);饲喂中等、低水平番茄渣不影响绵羊料重比(P>0.05),但饲喂高水平番茄渣显著提高了绵羊料重比(P<0.05),与饲喂中等水平番茄渣的绵羊差异不显著(P>0.05)。2)饲喂番茄渣不影响瘤胃液pH平均值(P>0.05);饲喂低水平番茄渣不影响瘤胃液氨态氮含量(P>0.05),而饲喂中等、高水平番茄渣极显著降低了瘤胃液氨态氮含量(P<0.01);饲喂中等、低水平番茄渣不影响饲喂后3、6和9 h时乙酸、丙酸和总挥发性脂肪酸浓度(P>0.05),但饲喂高水平番茄渣显著提高了饲喂后9 h时的乙酸浓度、饲喂后6和9 h丙酸浓度(P<0.05);饲喂番茄渣均可降低乙酸/丙酸,其中饲喂高水平时效果显著(P<0.05)。本试验条件下,用30%番茄渣等比替代饲粮中苜蓿干草可提高绵羊生长性能,并可以改善瘤胃发酵。
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新疆昌吉州草地生产力年际动态分析
《草原与草坪 》 2014
摘要:通过对新疆昌吉州草地生产力2006~2010年5年监测结果显示:各草地类型植被不同程度退化。植物种类减少,草群结构单一,优势种出现频率很低,一年生和短命植物比例增加,中山带毒害草(醉马草)大量出现;草层高度不同程度下降。除山地草甸外,高寒草甸、草甸草原、典型草原和荒漠草层高度下降明显,下降幅度都超过了10%;植被覆盖度降低。除荒漠外高寒草甸、山地草甸、草甸草原、荒漠草原和低地草甸下降明显,下降幅度都超过了10%;草地生产力不同程度下降,在2009~2010年草地生产力有所上升。
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浅析草原生态补偿机制
《草食家畜 》 2014
摘要:随着全球变暖,草原沙漠化进程的日趋加剧,草场退化,草地生态环境的日益恶化问题已经愈来愈突显。人类对草地生态系统服务功能的重要性的认识更为深入,促进草地生态安全屏障保护与生态服务价值增值,积极改进和落实草原生态补偿机制,持续合理地补偿草地生态服务的受损方,科学有效激发草原保护的积极性尤为重要。本文在充分理解草原生态补偿概念的基础上,系统总结国内外的研究成果,指出新疆草原生态补偿的紧迫性和重要性,并借鉴国外草原生态补偿的实践经验,从而提出了新疆牧区草场生态补偿的新机制,提出相关措施与政策建议。
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