科研产出
牛源金黄色葡萄球菌铁离子调控蛋白保守性和免疫效果研究
《动物医学进展 》 2013 北大核心 CSCD
摘要:为评价金黄色葡萄球菌铁离子调控蛋白B(IsdB)作为奶牛乳腺炎疫苗抗原的可能性,对我国分离的不同克隆复合群(CCs)3株菌的isdB基因进行序列测定、比对分析,并对XJ43(CC97)菌株的isdB基因进行原核表达、纯化,通过小鼠主动和被动免疫试验评价了其免疫保护效果。Blast分析显示,来源于不同克隆复合群菌株的isdB基因序列的同源性大于95%,说明isdB基因高度保守;IsdB蛋白主动免疫能显著降低攻毒菌对免疫鼠的损伤或免疫鼠的死亡率,而被动免疫不能降低小鼠的死亡率;用活的强毒力菌刺激产生的血清则能极显著地增加小鼠的存活率。本研究表明,虽然IsdB蛋白的主动免疫可以显著减弱金黄色葡萄球菌的致病作用,但以此单一成分为抗原的金黄色葡萄球菌疫苗的免疫保护效果具有很大的局限性。
关键词: 奶牛乳腺炎 金黄色葡萄球菌 铁离子调控蛋白B 免疫
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口蹄疫疫苗临床应用安全性及免疫效果监测分析
《中国畜牧兽医文摘 》 2013
摘要:为了掌握口蹄疫疫苗在新疆地区临床应用的免疫效果,本研究采用实地调研和实验室检测(液相阻断ELISA试验)的方式,对180个养殖场(户)和30个屠宰场免疫牲畜213837头(只)的934份血清样品进行了检测,并对不同疫苗生产厂家的疫苗安全性和免疫效果进行了比较分析。结果表明:O型口蹄疫疫苗接种奶牛的免疫合格率为66.67%~93.33%,肉牛的免疫合格率为23.33%~72.50%,羊的免疫合格率为50.00%~83.33%;亚洲I型口蹄疫疫苗接种奶牛的免疫合格率为46.67%~86.67%,肉牛的免疫合格率为13.33%~80.00%,羊的免疫合格率为46.67~90.00%;A和C厂家的疫苗安全性最高,B厂家疫苗次之,D厂家的疫苗安全性最低;羊出现应激反应的比例最高,为21.79%,猪次之,奶牛最低。
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阿勒泰地区农区舍饲养羊的发展与探讨
《黑龙江动物繁殖 》 2013
摘要:1舍饲养畜的必要性1.1草畜矛盾阿勒泰地区是典型的草原畜牧业地区,是新疆畜牧业生产的重要基地。境内可利用草原面积719万hm2,占全疆的15%,其中草原承包面积达706万hm2。阿勒泰全区不
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评价牛型布鲁氏菌疫苗免疫保护力BALB/c鼠模型的建立
《中国畜牧兽医 》 2013 北大核心
摘要:为建立评价流产布鲁氏菌疫苗株免疫保护力的小鼠模型,选取6周龄雌性BALB/c小鼠为试验动物,随机分为3组(n=40):A19免疫攻毒组、非免疫攻毒组和PBS对照组。A19免疫组腹腔接种BALB/c鼠A19 5.0×104 CFU,非免疫攻毒组和PBS对照组均接种PBS液0.2mL。免疫后45d,A19免疫攻毒组和非免疫攻毒组BALB/c鼠以3.0×104 CFU剂量的2308强毒株攻击,攻毒后15和45d分别剖杀小鼠,取小鼠脾脏称重、细菌分离、病理组织学检测。结果表明,攻毒后15d,A19免疫攻毒组与未免疫攻毒组和PBS对照组之间克脾指数差异显著(P<0.05);攻毒后45d,A19免疫攻毒组与PBS对照组的克脾指数差异不显著(P>0.05),与未免疫攻毒组克脾指数差异显著(P<0.05);免疫攻毒组的小鼠组织病理变化明显轻于未免疫攻毒组。结果表明,用BALB/c鼠为试验动物,以A19为疫苗参考株建立动物实验模型可以应用于牛型布鲁氏菌疫苗免疫保护力评价。
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铜绿假单胞菌外毒素A基因的克隆与原核表达
《草食家畜 》 2013
摘要:为建立铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)外毒素A(Exotoxin A,ETA)的原核表达方法,采用PCR技术扩eta基因,将其插入pET-28a载体构建重组质粒pET-28a-eta,并对重组质粒进行双酶切、PCR及测序鉴定。转入BL21(DE3)中诱导表达,检测目的蛋白大小及反应原性,然后进行表达条件的优化及其表达形式检测。结果表明,所扩增eta基因大小为1917 bp,与GeneBank参比序列一致性在98.70%;蛋白分析表明,rETA大小为74 KDa,具有和天然毒素相似的反应原性。目的基因在37℃、0.6 mmol/LIPTG诱导3 h获得最佳表达。该蛋白在超声波裂解上清和包涵体中均有分布,但主要以包涵体为主。该研究为进一步开展ETA的批量纯化提供了前提条件。
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细粒棘球绦虫Hsp70基因的克隆、表达及抗体制备
《中国畜牧兽医文摘 》 2013
摘要:[目的]克隆细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus,E.g)热休克蛋白家族基因Hsp70,在原核细胞中表达、纯化Hsp70蛋白并制备其特异性抗体.[方法]从包囊中分离原头蚴,提取RNA,RT-PCR扩增EgHsp70基因的cDNA,将其构建至原核表达载体pMAL-p2x,转化大肠杆菌BL-21菌株.通过改变诱导温度、IPTG浓度和诱导时间筛选出EgHsp70融合蛋白可溶性表达的最佳条件.并用麦芽糖亲和层析法纯化该蛋白.
关键词: Hsp70基因 细粒棘球绦虫 抗体制备 克隆 热休克蛋白 原核表达载体 IPTG浓度 特异性抗体
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