科研产出
建立高效的转基因动物鉴定技术体系
《草食家畜 》 2001
摘要：转基因动物的鉴定是转基因动物研究领域的重要内容。本文简要回顾了相关鉴定技术的研究进展 ,建立和完善了特异性PCR扩增及其产物酶切的转基因动物鉴定体系 ,在引物设计、PCR参数优化、设立内源性标记等方面作了进一步的改进 ,提高了PCR的特异性和可靠性。实验表明 ,PCR扩增及其产物酶切是一种准确、灵敏、简便、重现性好的转基因动物筛选鉴定方法
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生物活性因子对牛卵母细胞体外成熟及胚胎体外发育的影响
《草食家畜 》 2001
摘要：免疫活性肽 (ICP)和表皮生长因子 (EGF)是两种生物活性因子 ,ICP对牛卵母细胞体外成熟及胚胎体外培养的影响还未见报道。本实验将ICP ( 1 0、1 0 0、50 0ng/ml)和EGF ( 2 .5、2 5、50ng/ml)加入成熟液和培养液中 ,对照组中不含生物活性因子。结果表明ICP在浓度为 50 0ng/ml时对卵母细胞成熟有抑制作用 ,对胚胎发育无明显作用 ;EGF( 50ng/ml)对牛卵母细胞成熟和胚胎发育均有促进作用
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显微注射生产转人胰岛素原基因奶山羊
《中国兽医学报 》 2001 北大核心 CSCD
摘要：将构建的绵羊β-乳球蛋白基因 ( BLG)调控人胰岛素原基因的重组基因通过显微注射生产转基因奶山羊。同期化超排处理供体奶山羊 1 5只 ,排卵 2 62枚 ,回收卵 2 2 1枚 ,移植 2 0 6枚注射卵 ,移植受体 68只 ,怀孕2 1只 (妊娠率 3 3 % ,其中成年母羊妊娠率为 58.62 % ,周岁母羊为 9.4 % ) ,产羔 3 3只 ,其中母羔 8只 ,公羔 2 5只。经 PCR检测及酶切分析 ,证明有 5只为阳性 ,阳性整合率为 1 5.1 5% ,但 5只全为雄性
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荧光原位PCR定位动物精子介导转移的外源基因
《西北农业学报 》 2000 CSCD
摘要：用荧光原位 PCR对经体外介导外源基因转移方法处理的家畜精子进行检测。结果证实 ,牛、山羊和绵羊的精子在一定条件下能够携带所转移的外源基因 ,其平均转移效率分别为 :绵羊 2 7.1 2 %、牛 3 1 .1 6%、山羊 3 0 .57%。同时发现外源基因已进入精子细胞内并定位于核及其外围区域。
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小鼠早期桑椹胚和致密桑椹胚玻璃化冷冻保存试验
《草食家畜 》 2000
摘要：超排处理 152只昆明小白鼠 ,把出现阴道栓的 10 1只小白鼠进行冲卵 ,得到 932枚胚胎。在室温 (2 2℃ )下 ,利用不同浓度的EFS玻璃化液 ,从中选用 4 6 5枚桑椹胚进行一步法冷冻 ,选用4 0 1枚桑椹胚进行两步法冷冻。结果是胚胎在 10 %EG(乙二醇 )溶液中预先处理 5分钟 ,再移入事先配置好含有EFS30的 0 .2 5ml塑料细管中 ,平衡 2分种后直接投入液氮中冷冻 ,胚胎解冻后获得的发育率最高 (97.3% )。致密桑椹胚的发育率比早期桑椹胚好。两步法与一步法玻璃化冷冻保存相比差异不显著 (P >0 .0 5)。
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