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培养液中血清或其替代物对体外受精卵体外发育的影响

安徽农业科学 2007 北大核心 CSCD

摘要:探讨在体外受精卵体外培养液中添加血清替代品对体外受精卵发育的影响,确定血清在SOF培养液中合适的添加浓度及添加时期,以筛选优良的体外受精卵体外培养液。在SOF液中分别添加10%血清(NBS)8、mg/ml血清白蛋白(BSA)和1 mg/ml聚乙烯醇(PVA)进行体外受精卵的全程培养,添加NBS组的卵裂率(66.3%)显著高于添加BSA组(51.0%)(P<0.05),极显著高于添加PVA组(47.6%)(P<0.01);添加NBS组的囊胚发育率(30.9%)显著高于添加PVA组(20.7%)(P<0.05),极显著高于添加BSA组(13.6%)(P<0.01)。在培养液中添加不同浓度(10%、5%)的NBS及无血清培养液全程培养时,3组之间卵裂率(65.6%、60.0%、58.0%)差异不显著(P>0.05);10%NBS组囊胚发育率(30.0%)极显著高于5%NBS组(17.6%)和无血清组(6.0%)(P<0.01)。5%NBS组的囊胚发育率极显著地高于无血清组(P<0.01)。在受精卵培养的最初48 h用5%NBS,之后用10%NBS培养液时,卵裂率(58.6%)和囊胚发育率(29.3%)与SOF+10%NBS全程培养组(66.3%、30.9%)差异都不显著(P>0.05)。试验结果表明,SOF培养液中添加PVA、BSA替代血清时卵裂率和囊胚发育率都明显下降,可能SOF培养液中添加血清比添加PVA或BSA更有利于体外受精卵的体外发育。体外培养时在SOF培养液中添加一定浓度的血清以及改变血清的添加方式,可提高体外受精卵体外发育效果。

关键词: 体外受精 牛血清白蛋白 聚乙烯醇 血清 体外培养

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睾丸支持细胞分离、纯化及体外生长行为的研究

中国生物工程杂志 2007 北大核心 CSCD

摘要:了解睾丸支持细胞体外培养的生物学特性,试验采用组合酶消化和选择贴壁法,将5月龄、6月龄胎儿及新生睾丸支持细胞分离纯化后进行体外培养。试验结果显示,这一阶段睾丸适宜支持细胞分离纯化用;采用0.25%胰蛋白酶+0.02%EDTA二次消化法是一种经济有效的胎儿睾丸支持细胞分离方案;试验发现,胎儿睾丸支持细胞体外研究时间应控制在3~20天内,处于对数生长期的胎儿睾丸支持细胞,对体外受精卵体外发育有明显的促进作用。

关键词: 睾丸支持细胞 体外培养 生长行为

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绵羊卵母细胞孤雌发育的研究

西北农业学报 2007 北大核心 CSCD

摘要:系统地研究了绵羊卵母细胞成熟培养时间、6-DMAP激活时间以及改进的培养液对绵羊卵母细胞孤雌发育的影响。结果表明:卵母细胞成熟培养25 h和26 h激活组的囊胚率和孵化率显著高于成熟培养24 h激活组;6-DMAP激活液作用2 h,激活效果较好;培养液改进后,孤雌胚的囊胚率有上升趋势,但差异不显著。在本试验条件下,卵母细胞体外成熟培养25 h后在6-DMAP中激活2 h,利用改进后的培养液进行培养,能获得较好的发育效果。

关键词: 绵羊 卵母细胞 孤雌激活 6-DMAP

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爱普瑞克对皮蝇三期幼虫驱除疗效试验

草食家畜 2007

摘要:为对自然感染皮蝇蛆病的黄牛用爱普瑞克制剂进行驱虫疗效观察,本试验设爱普瑞克Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号注射液7个组,空白对照1个组,依据黄牛胸围和体长,按通常采用的黄牛体重估计公式,估算每头的体重,皮下注射药物。结果表明:Ⅰ号制剂剂量0.5mg/kg、1.0mg/kg、1.5mg/kg,Ⅱ号制剂剂量1.0mg/kg,Ⅲ号制剂剂量1.0mg/kg,注药后第30d全部瘤疱隆起消失,恢复健康。结论为爱普瑞克制剂剂量在1.0mg/kg以上或爱普瑞克Ⅰ号、Ⅲ号注射液剂量在0.5mg/kg时,驱治皮蝇蛆病效果极好,但爱普瑞克Ⅱ号注射液剂量0.5mg/kg,治疗皮蝇蛆病效果欠佳。

关键词: 爱普瑞克(Eprinomectin) 牛皮蝇(Hypoderma bovis) 黄牛

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胚胎移植技术应用上存在的问题及解决策略

黑龙江动物繁殖 2006

摘要:为了提高奶的繁殖力和胚胎移植的效果,本文结合生产实践,针对目前在繁殖生产中容易出现的问题和影响胚胎移植技术实施的因素,进行了较为全面的分析探讨,并提出了具体解决措施。

关键词: 繁殖 胚胎移植

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应用PCR法和LAMP法鉴定早期胚胎性别的研究

新疆农业大学学报 2006

摘要:通过设计特异性引物,优化Mg2+浓度、退火温度和循环时间等影响PCR的因素,确定了适合现场应用的PCR反应体系;46枚胚胎现场的鉴定率为87%,移植妊娠率为28%,准确率为85%,证明建立的PCR胚胎性别鉴定方法可用于生产。使用LAMP法对126枚常规胚胎和42枚性控胚胎现场鉴定,鉴定率95%,移植妊娠率33%,准确率88%,结果证明该方法可应用于早期胚胎性别鉴定。PCR法和LAMP法所鉴定同一样品的结果一致,说明在控制好实验条件的情况下,根据实际情况可选用这两种方法中的任何一种进行性别鉴定应用。

关键词: 胚胎 性别鉴定 PCR LAMP

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应用牙釉蛋白(AML)基因鉴别早期胚胎性别

农业生物技术学报 2005 CSCD

摘要:牙釉蛋白(AML)基因定位于X染色体和Y染色体上的同源区域。实验根据X、Y染色体AML基因第五内含子上序列同源性只有45.1%以及X、Y染色体该区段之间存在多处碱基缺失的特点,合成了1对性别特异性引物。该引物经扩增后母只得到1条467bp的来自X染色体的扩增条带,而公能得到1条源自X染色体的467bp片段的扩增条带和1条源自Y染色体的341bp的扩增条带。经基因组DNA验证,该引物的公母鉴定准确率为100%,同时该对引物具有高度的特异性。定量分析AML基因引物的反应灵敏度,发现1次PCR(30个循环)能扩增出0.5ng的基因组DNA,2次PCR(共50个循环)能扩增出20pg的基因组DNA。将AML基因引物与SRY基因引物的反应灵敏度相比较,结果表明前者的灵敏度比后者的高8~10倍。用AML基因反应体系鉴定了26枚优质胚胎,其中24枚有扩增结果,13枚鉴定为公,11枚鉴定为母

关键词: AML基因 胚胎 性别鉴定

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几个肉品质性状的QTL分析

西北农业学报 2005 北大核心 CSCD

摘要:测定了利木赞×娟姗杂交一代3头公所有回交后代的背最长肌和半腱肌的剪切力、pH值及煮 制损失3个表型性状,与已构建的遗传连锁图谱和基因型值相结合,利用QTL Express软件的“Half-Sib QTL Analysis Servlet”进行QTL分析。共发现6个可能的QTL位点,其中背最长肌剪切力性状3个QTL(BTA2 45 cM,BTA29 54 cM)、半腱肌剪切力1个QTL(BTA2 12 cM)、半腱肌pH值1个QTL(BTA24 0 cM)、背最长肌 煮制损失1个QTL(BTA142 cM)。

关键词: QTL 剪切力

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皮肤成纤维细胞体外培养系统的建立

草食家畜 2005

摘要:本研究用组织块培养法和冷消化培养法对皮肤成纤维细胞进行原代培养和传代培养,并探讨了传代的方法,结果表明建立的方法可用于皮肤成纤维细胞的建系。

关键词: 皮肤成纤维细胞 细胞系

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异种卵泡液对牛卵母细胞体外成熟率的影响

草食家畜 2005

摘要:本研究探讨了异种卵泡液对牛卵母细胞体外成熟率的影响。结果表明,在培养基中添加适当浓度的山羊、绵羊、骆驼卵泡液代替血清,牛卵母细胞的成熟率(67.9%、68.5%、65.3%)与血清对照组(72.0%)无显著差异(P>0.05);在添加山羊、绵羊、骆驼卵泡液的基础上补充激素,卵母细胞的成熟率(70.8%、72.9%、69.7%)也未见明显提高(P>0.05)。

关键词: 卵泡液 卵母细胞 成熟率

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