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靶向O型口蹄疫病毒shRNA转基因猪体细胞抗病毒活性研究

文献类型： 中文期刊

作者： 蔡扩军 1 ; 马铈委 1 ; 乔军 1 ; 孟庆玲 1 ; 陈创夫 1 ; 黄炯 2 ; 张再超 1 ; 杨海波 1 ;

作者机构： 1.石河子大学动物科技学院

2.新疆畜牧科学院兽医研究所

关键词： shRNA;转基因克隆猪;体细胞;抗病毒活性

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2013 年 35 卷 01 期

页码： 5-9

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为研究靶向O型口蹄疫病毒(FMDV)VP1基因shRNA转基因猪体细胞的抗病毒活性,本实验在成功培育转基因克隆猪的基础上,通过分离与培养转基因猪体细胞,对其shRNA进行PCR和Southern blot检测,并将FMDV感染体细胞中,通过细胞病变(CPE)、间接免疫荧光试验(IFA)和实时荧光定量PCR(Real-time PCR)分析转基因猪体细胞抗FMDV活性。结果表明,转基因猪体细胞基因组DNA中携带有靶向FMDV VP1基因的shRNA基因片段。与非转基因猪体细胞相比,接种FMDV转基因猪体细胞其出现CPE的时间延迟,细胞内病毒含量显著降低,细胞感染病毒36 h时,对细胞中FMDV VP1基因抑制效率为53.6%。表明该靶向FMDV shRNA转基因克隆猪体细胞在体外具有良好的抗病毒活性。本研究为进一步在体内评价转基因动物的抗病毒活性奠定了基础。

  • 相关文献

[1]7个shRNA分子对绵羊BMPR-1B基因的干扰作用分析. 金贤华,林嘉鹏,白杰,刘晨曦,汪立芹,阿米娜,周川,黄俊成. 2012

[2]针对Oct-4和Survivin基因的双靶向shRNA腺病毒载体的构建及其对肝癌细胞的抑制作用. 王端明,王敬晗,李林芳,陈静波,苏长青. 2012

[3]Knockdown of endogenous myostatin promotes sheep myoblast proliferation. Liu, Chenxi,Li, Wenrong,Zhang, Xuemei,Zhang, Ning,He, Sangang,Huang, Juncheng,Liu, Mingjun,Ge, Yubin.

[4]The critical role of myostatin in differentiation of sheep myoblasts. Liu, Chenxi,Liu, Chenxi,Li, Wenrong,Zhang, Xuemei,Zhang, Ning,He, Sangang,Huang, Juncheng,Liu, Mingjun,Li, Wenrong,Zhang, Xuemei,Zhang, Ning,He, Sangang,Huang, Juncheng,Liu, Mingjun,Li, Wenrong,Zhang, Xuemei,Zhang, Ning,He, Sangang,Huang, Juncheng,Liu, Mingjun,Ge, Yubin.

[5]动物的克隆. 史洪才,王立虎. 2001

[6]脂质体介导法转染体细胞效率的优化. 侯颖,李文蓉,谭立新,牛志刚. 2005

[7]美国家畜繁育生物技术研究动态与发展趋势——2002年中美农业科技交流与合作第六项目组赴美考察报告. 郭志勤,刘明军,李文蓉,杨梅. 2003

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