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重组酶介导等温核酸扩增技术检测伯氏疏螺旋体方法的建立

文献类型: 中文期刊

作者: 马晓菁 1 ; 谢彩云 1 ; 刘丽娅 1 ; 叶锋 1 ; 谷文喜 1 ; 钟旗 1 ; 易新萍 1 ;

作者机构: 1.新疆维吾尔自治区畜牧科学院兽医研究所

关键词: 重组酶介导扩增;伯氏疏螺旋体;检测;莱姆病

期刊名称: 中国兽医杂志

ISSN:

年卷期: 2021 年 003 期

页码: 77-79

收录情况: 北大核心

摘要: 本试验采用重组酶介导等温核酸扩增(RAA)技术建立伯氏疏螺旋体核酸的检测方法。根据伯氏疏螺旋体16S rRNA基因保守序列设计并合成特异性RAA引物,采用重组酶介导扩增技术电泳法,以10倍系列稀释1 ng/μL伯氏疏螺旋体B31基因组DNA为模板进行RAA,测定该方法的敏感性。通过对大肠杆菌、沙门菌、钩端螺旋体基因组DNA扩增验证该方法的特异性。结果显示,该方法对伯氏疏螺旋体标准株的B31基因组DNA检测限约为100 fg/μL,对大肠杆菌、沙门菌、钩端螺旋体均无扩增,具有良好的特异性。RAA具有特异性高、检测快速、灵敏等优点,本研究建立的伯氏疏螺旋体RAA检测方法,为伯氏疏螺旋体临床样本的快速诊断提供依据。

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