文献类型： 中文期刊
作者： 徐志光 1 ; 许礼义 1 ; 呼西旦 1 ; 宋振忠 1 ; 徐敏 2 ;
作者机构： 1.新疆畜牧科学院兽医研究所
2.新疆乌鲁木齐市动物疾病控制与诊断中心
关键词： 牛分枝杆菌;ESAT-6;表达;纯化
期刊名称： 草食家畜
ISSN： 1003-6377
年卷期： 2010 年 01 期
页码： 74-77
摘要： 构建牛结核分枝杆菌ESAT-6基因的原核表达载体,诱导表达、纯化并初步鉴定该蛋白。方法:以牛型分枝杆菌基因组DNA为模板,PCR方法扩增ESAT-6基因,产物通过双酶切克隆入pET-22b(+)质粒,经PCR、酶切、测序等方法鉴定后,转入大肠杆菌BL21(DE3)polys菌体,经IPTG诱导表达蛋白;利用Western-blot鉴定重组蛋白后,纯化目的蛋白。结果:所获得ESAT-6基因序列与GenBank公布的完全一致。经SDS-PAGE分析和Western-blot鉴定均发现在6kDa处有特异性蛋白条带。纯化的蛋白的大小与蛋白质分子量标准比较一致。结论:成功表达纯化并鉴定构建了ESAT-6融合蛋白。
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